[发明专利]基于进化信息构建嵌合SaCas9用于增强和扩展PAM位点的识别

摘要

本发明提出了一种Cas9蛋白突变体。该Cas9蛋白突变体具有：框架区；和PAM识别区，所述PAM识别区识别下列核酸序列的至少之一：5’‑NNNRRT‑3’；5’‑NNNRRN‑3’；5’‑NNNRCN‑3’；5’‑NNNRTN‑3’；5’‑NNNCAA‑3’；5’‑NNNCAT‑3’；5’‑NNNCGT‑3’；5’‑NNNCGC‑3’；5’‑NNNGTN‑3’；5’‑NNNTCN‑3’；5’‑NNNTTC‑3’；5’‑NNNTTG‑3’；5’‑NNNTTT‑3’；N＝A、T、G或C，R＝A或G。

主权项

1.一种Cas9蛋白突变体，其特征在于，其具有：/n框架区；和/nPAM识别区，所述PAM识别区识别下列核酸序列的至少之一：/n5’-NNNRRT-3’，N＝A、T、G或C、R＝A或G；/n5’-NNNRRN-3’，N＝A、T、G或C、R＝A或G；/n5’-NNNRCN-3’，N＝A、T、G或C、R＝A或G；/n5’-NNNRTN-3’，N＝A、T、G或C、R＝A或G；/n5’-NNNCAA-3’，N＝A、T、G或C；/n5’-NNNCAT-3’，N＝A、T、G或C；/n5’-NNNCGT-3’，N＝A、T、G或C；/n5’-NNNCGC-3’，N＝A、T、G或C；/n5’-NNNGTN-3’，N＝A、T、G或C；/n5’-NNNTCN-3’，N＝A、T、G或C；/n5’-NNNTTC-3’，N＝A、T、G或C；/n5’-NNNTTG-3’，N＝A、T、G或C；/n5’-NNNTTT-3’，N＝A、T、G或C。/n