[发明专利]一种非极性氨基酸高产菌株的筛选方法在审
申请号: | 201810708595.4 | 申请日: | 2018-07-02 |
公开(公告)号: | CN108707576A | 公开(公告)日: | 2018-10-26 |
发明(设计)人: | 霍毅欣;王宁;郑博;马晓焉 | 申请(专利权)人: | 北京理工大学;苏州工业园区洛加大先进技术研究院 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N13/00;C12N15/01;C12R1/15;C12R1/19 |
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地址: | 100081 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种筛选非极性氨基酸高产菌株的筛选方法。本发明所提供的筛选方法是按照包括以下步骤进行:在所筛选的微生物中确定非极性氨基酸对应密码子使用频率,选择能够在所筛菌株中表达新的抗性或表型性状的基因作为筛选标记,将其核酸序列中某一非极性氨基酸的所有密码子替换为稀有密码子,人工合成筛选基因并连接至筛选质粒上。在人工诱变等方法获得微生物的突变库中转化入筛选质粒,通过检测筛选基因的表达水平,可以从突变菌株中挑选出高产非极性氨基酸的菌株。本发明利用生物对密码子的偏好性,实现了对高产非极性氨基酸菌株的筛选,并成功在大肠杆菌中筛选出一株高产L‑亮氨酸的突变菌株。 | ||
搜索关键词: | 非极性氨基酸 筛选 菌株 高产菌株 筛选基因 突变菌株 高产 质粒 微生物 密码子使用频率 大肠杆菌 密码子替换 稀有密码子 表达水平 表型性状 核酸序列 人工诱变 筛选标记 亮氨酸 密码子 偏好性 突变库 抗性 基因 检测 成功 | ||
【主权项】:
1.一种利用稀有密码子筛选非极性氨基酸高产菌株的方法,其特征是分析微生物对密码子的偏好性,通过导入经稀有密码子替换的外源基因,实现对非极性氨基酸高产菌株的筛选作用。
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