[发明专利]一株胞外分泌表达桦褐孔菌二肽酶的工程菌有效

专利信息
申请号: 201810575876.7 申请日: 2018-06-06
公开(公告)号: CN110564634B 公开(公告)日: 2021-04-27
发明(设计)人: 黄金金;郑维发;王艳 申请(专利权)人: 江苏师范大学
主分类号: C12N1/19 分类号: C12N1/19;C12N9/48;C12N15/81;C12R1/84
代理公司: 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人: 楼高潮
地址: 221000 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 一株胞外分泌表达桦褐孔菌二肽酶的工程菌,通过利用克隆的桦褐孔菌去跨膜区的二肽酶基因IDP与表达载体可操作地连接,得到能够表达该蛋白的重组表达载体,并将上述重组表达载体导入恰当的宿主细胞中而获得。本发明还提供一种制备上述IDP的方法,其是通过培养IDP‑X33,经甲醇诱导表达获得桦褐孔菌去跨膜区的二肽酶IDP。所述培养条件为28℃,初始pH为7,200rpm培养96小时。所述诱导条件为每24小时补充一次诱导物甲醇,至甲醇终浓度为1.0%。本发明的提供的重组毕赤酵母表达二肽酶方法,胞外分泌酶活达到24U/mL,细胞密度(OD600)为24.5,酶的分泌效率为1U/mL。
搜索关键词: 一株胞 外分泌 表达 桦褐孔菌 二肽酶 工程
【主权项】:
1.一株胞外分泌表达桦褐孔菌二肽酶的工程菌,其为重组载体转化的宿主细胞,其特征在于,所述重组载体含有桦褐孔菌二肽酶基因,所述桦褐孔菌二肽酶基因的核苷酸序列为下列序列之一:/n(1)如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列;/n(2)如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列经添加、替换、插入或缺失一个或几个核苷酸而成的同源序列;/n(3)如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列的等位基因或所述等位基因衍生物的核苷酸序列。/n
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