[发明专利]一种基于驼源抗PPRV cDNA文库及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201810501728.0 | 申请日： | 2018-05-23 |
| 公开（公告）号： | CN108676792B | 公开（公告）日： | 2020-12-25 |
| 发明（设计）人： | 吴锦艳;尚佑军;田宏;曹小安;惠小婷;李玲霞;关玉华;刘湘涛;刘永生 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N15/63;C12N15/66;C12N15/13;C40B50/06;C40B40/02 |
| 代理公司： | 甘肃省知识产权事务中心代理有限公司 62100 | 代理人： | 武战翠 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： |
本发明公开了一种基于驼源抗PPRV cDNA文库及其制备方法和应用，属于生物技术领域。其利用PPRV弱毒苗及浓缩、纯化弱毒苗制备抗原免疫骆驼，获得高质量免疫血清及全血；利用两端分别带有SfiIA、SfiIB酶切位点引物逆转录外周血淋巴细胞提取的总mRNA，合成全长cDNA第一链，PCR扩增，SfiI单酶切后定向插入特定载体pGADT7‑SfiI，获得基于驼源抗小反刍兽疫病毒抗体cDNA文库。经鉴定：文库库容约2.0×10 |
||
| 搜索关键词： | 一种 基于 驼源抗 pprv cdna 文库 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种基于驼源抗PPRV cDNA文库的制备方法，其特征在于：具体包括以下步骤：步骤A：通过小反刍兽疫免疫骆驼程序获得免疫血清；步骤B：根据血清抗体效价检测免疫血清，骆驼免疫合格后，采集免疫骆驼全血加抗凝剂，摇匀，稀释后将其加入骆驼淋巴细胞分离液得到分离骆驼外周血的淋巴细胞，从中提取Total RNA，分离、纯化mRNA ；步骤C：利用两端分别带有SfiIA、SfiIB酶切位点引物逆转录外周血淋巴细胞提取的总mRNA，合成全长cDNA第一链，扩增，SfiI单酶切后定向插入特定载体 pGADT7‑SfiI vector ，获得基于驼源抗PPRV cDNA文库。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国农业科学院兰州兽医研究所，未经中国农业科学院兰州兽医研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201810501728.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
