[发明专利]一种PhaP-Tac的微生物合成及其对疏水材料PHBV的修饰方法

摘要

本发明公开了一种PhaP‑Tac的微生物合成及其对疏水材料PHBV的修饰方法，在微生物体内融合表达PHA颗粒结合蛋白PhaP和一种抗菌肽Tac(tachyplesin I,简称为Tac)所形成的一种融合蛋白PhaP‑Tac，然后利用PhaP与疏水材料表面间的疏水相互作用，将抗菌肽锚定到疏水材料表面，从而赋予疏水材料抗菌性能。其使用大肠杆菌作为表达宿主表达纯化了细菌来源的PhaP和中华鲎抗菌肽Tac的融合蛋白PhaP‑Tac，赋予PHA材料抗菌活性，经过PhaP‑Tac进行表面修饰的聚3‑羟基丁酸‑3‑羟基戊酸酯(PHBV)可有效的抑制革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的生长，而且经过修饰的PHBV材料亲水性提高，有利于成纤维细胞附着生长，通过PhaP蛋白将抗菌肽对PHBV材料进行修饰赋予材料抗菌活性，对抑制局部细菌感染是一种行之有效的策略。

主权项

1.一种PhaP‑Tac的微生物合成，其特征在于，1)将PhaP蛋白和中华鲎抗菌肽Tac融合形成融合蛋白PhaP‑Tac；2)由融合蛋白PhaP‑Tac结合到疏水材料PHBV表面形成抗菌材料PhaP‑Tac‑PHBV；3)由聚羟基脂肪酸酯颗粒结合蛋白和中华鲎抗菌肽融合蛋白PhaP‑Tac的氨基酸序列如序列表中序列1所示；所述1)中为确保蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)成功表达，对其密码子进行优化，构建两个质粒pET28aPhaP和pET28aPhaPTac，并将构建质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)分别表达靶蛋白；PhaP‑Tac蛋白以部分可溶形式存在。