[发明专利]干扰IFN-gama表达的CD19-CAR-T细胞及其应用

摘要

本发明公开了两种干扰人IFN‑gama基因表达的shRNA，如SEQ ID NO:1、2所示。本发明还公开了一种慢病毒表达载体，其包含有干扰人IFN‑gama基因表达的shRNA，以及如SEQ ID NO:4所示的编码嵌合抗原受体的核苷酸片段。本发明还公开了一种干扰人IFN‑gama基因表达的CD19‑CAR‑T细胞，为包含有慢病毒表达载体的T淋巴细胞，或染色体中整合有干扰人IFN‑gama基因表达的shRNA，以及编码嵌合抗原受体的核苷酸片段的T淋巴细胞。本发明的CAR‑T细胞引入了IFN‑gama shRNA，在表达CAR的同时共表达IFN‑gama的shRNA，通过基因沉默技术从源头抑制IFN‑gama的释放，从而降低CRS的影响，提高CAR‑T治疗的安全性。可以预计，在制备预防、治疗、辅助治疗恶性肿瘤的药物中将有着重要的应用。

主权项

1.干扰人IFN‑gama基因表达的shRNA，其特征在于：为IFN‑gama shRNA‑1，或IFN‑gama shRNA‑3，IFN‑gama shRNA‑1的核苷酸序列如下所示，IFN‑gama shRNA‑3的核苷酸序列如下所示：IFN‑gama shRNA‑1,如SEQ ID NO:1所示：GCGGCCGCCGCAGAGCCAAATTGTCTCCTTTTCAAGAGAAAGGAGACAATTTGGCTCTGCTTTTT。IFN‑gama shRNA‑3,如SEQ ID NO:2所示：GCGGCCGCCCATTCAGATGTAGCGGATAATTTCAAGAGAATTATCCGCTACATCTGAATGTTTTT。