[发明专利]多重标签串联的DNA序列及其在蛋白质表达纯化系统的应用

摘要

本发明提供了一种多重标签串联的DNA序列及其在蛋白质表达纯化系统的应用，具体地，本发明提供了一种核酸构建物，所述核酸构建物具有从5’至3’的式I结构：Z1‑Z2‑Z3‑Z4‑Z5 (I)；式中，Z1－Z5分别为用于构成所述构建物的元件；各“‑”独立地为键或核苷酸连接序列；Z1为前导肽的编码序列；Z2为无或泛素的编码序列；Z3为标签蛋白的编码序列；Z4为连接序列；Z5为无或外源蛋白的编码序列。本发明的核酸构建物可显著提高外源蛋白合成的效率，并简化目标外源蛋白的表达与纯化过程。

主权项

1.一种核酸构建物，其特征在于，所述核酸构建物具有从5’至3’的式I结构：Z1‑Z2‑Z3‑Z4‑Z5    (I)式中，Z1－Z5分别为用于构成所述构建物的元件；各“‑”独立地为键或核苷酸连接序列；Z1为前导肽的编码序列；Z2为无或泛素的编码序列；Z3为标签蛋白的编码序列；Z4为连接序列；Z5为无或外源蛋白的编码序列；其中，所述前导肽的编码序列选自下组：(a) 编码如SEQ ID NO.:2所示多肽的多核苷酸；(b) 序列如SEQ ID NO.:1所示的多核苷酸；(c) 核苷酸序列与SEQ ID NO.:1所示序列的同源性≥75%(较佳地≥85%，更佳地≥90%或≥95%或≥98%或≥99％)的多核苷酸；(d) 在SEQ ID NO.:1所示多核苷酸的5'端和/或3'端截短或添加1‑60个(较佳地1‑30，更佳地1‑10个)核苷酸的多核苷酸；(e) 与(a)‑(d)任一所述的多核苷酸互补的多核苷酸。