[发明专利]一种磁珠法提取DNA的试剂盒及提取方法有效
申请号: | 201810375852.7 | 申请日: | 2018-04-25 |
公开(公告)号: | CN108676791B | 公开(公告)日: | 2022-03-25 |
发明(设计)人: | 黄宵;戴明雁;徐华莉;高颖;张明洲 | 申请(专利权)人: | 浙江迪恩生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 杭州天昊专利代理事务所(特殊普通合伙) 33283 | 代理人: | 向庆宁 |
地址: | 310000 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种磁珠提取DNA提取试剂盒,以及快速简介的提取多糖真菌DNA的方法。所述试剂盒包含溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ、溶液Ⅳ、洗涤液、洗脱液和磁珠悬浮液。本申请创新性的使用溶液Ⅱ对产菌核真菌的多糖物质进行剔除,使得在DNA提取过程中避免胞外多糖的干扰。试验过程中还创新性的对试剂盒所使用的磁珠进行了预处理,以DNA作为分子靶标,减少磁珠对RNA和蛋白质的吸附能力,该操作具有较高特异性的突出特点。该试剂盒适用于多糖类真菌的DNA提取,检测简单便捷,降低了胞外多糖对DNA提取的干扰。 | ||
搜索关键词: | 一种 磁珠法 提取 dna 试剂盒 方法 | ||
【主权项】:
1.一种磁珠法产菌核真菌DNA提取试剂盒,其特征在于包括:溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ、溶液Ⅳ、洗涤液、洗脱液和磁珠悬浮液;所述磁珠悬浮液:磁珠材质为纳米磁性氧化铁,直径为1.2‑2mm;所述溶液Ⅰ由葡萄糖,Tris‑HCl和EDTA组成,pH值为8.0;所述溶液Ⅱ为无水乙醇和醋酸钾溶液;所述溶液Ⅲ为SDS溶液(氢氧化钠溶液稀释);所述溶液Ⅳ包含盐酸胍和醋酸钾,pH值为3.5~4.5;所述洗涤液为乙醇溶液;所述洗脱液为去离子水;其中,所述的磁珠悬浮液经过如下处理步骤处理:磁珠在双甘膦溶液进行浸泡5‑10小时后用PBS缓冲液(pH=7.0)冲洗5‑8次,将取出的磁珠再浸入异硫氰酸胍溶液5‑6小时,PBS缓冲液冲洗5‑8次后备用。
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