[发明专利]利用全景细胞多维系统检测水体镉离子的方法及其应用

摘要

本发明公开了一种利用全景细胞多维系统检测水体镉离子的方法及其应用，利用全景细胞多维系统检测水体镉离子的方法按照下述步骤进行：将Cd²⁺加入到Datko培养基上，得到含镉Datko培养基；将浮萍培养于得到的含镉Datko培养基上，培养24小时，得到浮萍植株；夹取浮萍植株，用A液清洗后，将所述浮萍植株放入离心管中，加入组织固定液固定所述浮萍植株15～20min；利用全景细胞多维系统分析检测，通过荧光对镉离子进行定位分析，根据荧光强度分析镉离子含量。本发明首创利用全景细胞多维系统检测水体中的镉离子，可在短时间内检测水体中有无镉离子，应用于水体镉污染检测，弥补了传统的镉离子测定方法的缺点。

主权项

1.一种利用全景细胞多维系统检测水体镉离子的方法，其特征在于，按照下述步骤进行：步骤1，调整Datko培养基的PH至5.6～5.8，于100～105kPa、120～125℃下进行灭菌；所述Datko培养基如下：步骤2，将Cd²⁺加入到步骤1得到的Datko培养基上，得到含镉Datko培养基；步骤3，采集浮萍，将浮萍培养于步骤2得到的含镉Datko培养基上，培养24小时，得到浮萍植株，其中，培养条件为：温度18～25℃，光周期16～18小时/天，光强95～97μmol m^‑2s^‑1；步骤4，夹取步骤3得到的浮萍植株，用A液清洗后，将所述浮萍植株放入离心管中，加入组织固定液固定所述浮萍植株15～20min；其中，所述组织固定液如下：乙醇水溶液          85～95g/l冰醋酸              95～100g/l去离子水            溶剂，其中，在所述乙醇水溶液中，乙醇的体积浓度为80～90％；所述A液如下：步骤5，在酶解温度为23～27℃的条件下，用组织酶解液在黑暗条件下酶解步骤4所得的浮萍植株25～30min，每间隔10～15min吹打混匀一次，得到悬浮的浮萍原生质体；所述组织酶解液如下：步骤6，通过离心对步骤5所得的浮萍原生质体清洗2～5次，每次清洗的过程为：用20～25℃的B液垂直打入浮萍原生质体所在离心管，以使浮萍原生质体悬浮，悬浮后进行离心，离心后移除上层清液；所述B液如下：步骤7，对浮萍原生质体清洗后，用B液重悬浮萍原生质体，并用移液枪吹打均匀；吹打均匀后，滴20μl Green AM，在黑暗条件下，于37～40℃染色15～20min；步骤8，按照步骤6所述清洗的过程清洗步骤7得到的浮萍原生质体2～5次；步骤9，利用全景细胞多维系统分析检测，通过荧光对镉离子进行定位分析，根据荧光强度分析镉离子含量。