[发明专利]一种利用生物样本直接构建靶向文库的方法在审
| 申请号： | 201810310384.5 | 申请日： | 2018-04-09 |
| 公开（公告）号： | CN110359096A | 公开（公告）日： | 2019-10-22 |
| 发明（设计）人： | 杨林;张海萍;高雅;陈芳;于靖 | 申请（专利权）人： | 深圳华大智造科技有限公司 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 518083 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用生物样本直接构建靶向文库的方法。该方法以生物样本为模板，采用若干个特异引物对和至少一个通用引物对进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；然后将PCR扩增产物纯化，得到靶向文库；每个特异引物对包括两条引物，一条包括通用接头序列和区段a，另一条包括通用接头序列和区段b；区段a和区段b根据靶基因的核苷酸序列设计；每个通用引物对包括两条引物，两条引物均包括测序接头序列和通用接头序列。实验证明，采用本发明提供的方法构建的快速靶向文库不仅准确率高、耗时短、操作简便，而且不容易造成样本之间的污染，具有重大的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 靶向 文库 生物样本 通用接头 构建 引物 通用引物对 特异引物 核苷酸序列 接头序列 靶基因 准确率 测序 耗时 样本 污染 应用 | ||
【主权项】：
1.一种构建靶向文库的方法，包括如下步骤：(1)以生物样本为模板，采用若干个特异引物对和至少一个通用引物对进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；(2)取步骤(1)得到PCR扩增产物，纯化，得到的纯化产物即为靶向文库；每个特异引物对包括两条引物；一条引物从5’末端到3’末端依次包括通用接头序列甲和区段a，另一条引物从5’末端到3’末端依次包括通用接头序列乙和区段b；区段a和区段b均根据靶基因的核苷酸序列设计；各个特异引物对中区段a和区段b的核苷酸序列不同，可结合至靶基因的不同位置；每个通用引物对包括两条引物；一条引物从5’末端到3’末端依次包括测序接头序列甲和通用接头序列甲，另一条引物从5’末端到3’末端依次包括测序接头序列乙和通用接头序列乙。
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