[发明专利]一种紫荆组织培养方法

摘要

本发明公开了一种紫荆组织培养方法，该一种紫荆组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：i、前处理：9～10月收集成熟荚果，取种子，清洗、灭菌，无水乙醇浸泡，晾干；ii、初始培养：将种子接种于特制A培养基中培养；向A培养基中加入特制B液，再培养，得到幼苗；iii、增殖培养：将幼苗剪下，转接到特制C培养基中培养；向C培养基中加入特制D液，再培养；iv、进一步培养：将增殖培养后的幼苗剪下，转接到特制E培养基中培养；过程中严格控温、控光照、控时间和物料添加量，具有提高抗寒性的优点。

主权项

1.一种紫荆组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：i、前处理：9～10月收集成熟荚果，取出种子，清洗、灭菌，用4～6℃无水乙醇浸泡种子5.5～6.0hr，于25～28℃下晾干；ii、初始培养：将前处理后的种子接种于A培养基中，放至18～20℃和1500～1600lx下培养3.5～4.0天；向A培养基中加入B液，放入22～24℃和2000～2100lx下培养6.5～7.0天，得到幼苗；A培养基为MS+蔗糖25～27g/l+琼脂6.8～7.0g/l+氯化钠56～60mg/l+羧甲基纤维素钠4.5～4.8mg/l+羟甲基纤维素钠2.5～2.7mg/l，pH为5.5～6.0；B液包括氯化钠2.5～2.8wt％、羟甲基纤维素钠0.12～0.15wt％、碳酸氢钠4.0～4.2wt％和水22.5～23.2wt％，B液的基础溶剂为丙酮；按质量计，A培养基和B混合液的用量比为1∶0.08～0.10；iii、增殖培养：将幼苗剪下，转接到C培养基中，放至22～24℃和2400～2500lx下培养15.0～15.5天；向C培养基中加入D液，放入15～16℃和2400～2500lx下培养3.5～4.0天；C培养基为MS+6‑苄氨基腺嘌呤3.0～3.2mg/l+吲哚丁酸1.2～1.4mg/l+萘乙酸0.2～0.3mg/l+氯化钠80～85mg/l+羟丙基甲基纤维素2.1～2.2mg/l+聚丙烯酰胺1.4～1.5mg/l；D液包括氯化钠5.1～5.4wt％、羟丙基甲基纤维素0.25～0.28wt％、碳酸氢钠3.1～3.2wt％和水34.2～34.5wt％，D液的基础溶剂为乙酸乙酯；按质量计，C培养基和D混合液的用量比为1∶0.11～0.12；iv、进一步培养：将增殖培养后的幼苗剪下，转接到E培养基中，放至8～10℃和1500～1600lx下培养20.5～21.5天；E培养基为1/2MS+吲哚丁酸0.6～0.8mg/l+萘乙酸0.4～0.5mg/l+氯化钠125～130mg/l+聚丙烯酰胺1.9～2.0mg/l+火山灰144～150mg/l+羟丙基变性淀粉44～48mg/l。