[发明专利]一种抗枯萎病香蕉种质的筛选方法在审
申请号: | 201810258980.3 | 申请日: | 2018-03-27 |
公开(公告)号: | CN108476981A | 公开(公告)日: | 2018-09-04 |
发明(设计)人: | 金志强;徐碧玉;张建斌;刘菊华;贾彩红;王卓;苗红霞;王甲水;王安邦;王静毅 | 申请(专利权)人: | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;A01H1/04;A01H1/06 |
代理公司: | 深圳市千纳专利代理有限公司 44218 | 代理人: | 刘洋 |
地址: | 571101 *** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | 本发明属于香蕉愈伤组织辐射诱变育种领域,具体涉及一种抗枯萎病香蕉种质的筛选方法。选取香蕉未成熟雄花愈伤组织为辐射突变材料,采用含有不同浓度镰刀菌FOR4粗毒素培养基进行香蕉未成熟雄花愈伤组织粗毒素筛选、分化芽粗毒素筛选、香蕉生根苗粗毒素筛选等,采用三次毒素胁迫筛选技术,增强了筛选压力,提高了抗枯萎病突变种质的筛选效率,缩短了培育香蕉抗枯萎病种质筛选时间,提高抗病育种的效率。 | ||
搜索关键词: | 筛选 粗毒素 香蕉 愈伤组织 种质 雄花 抗枯萎病香蕉 枯萎病 未成熟 辐射诱变育种 抗病育种 突变材料 种质筛选 培养基 分化芽 镰刀菌 生根苗 毒素 突变 胁迫 辐射 培育 | ||
【主权项】:
1.一种抗枯萎病香蕉种质的筛选方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)粗毒素制备将Foc4菌种接种至培养基中培养,分离得到香蕉枯萎病菌粗毒素;(2)香蕉未成熟雄花愈伤组织的辐射处理对香蕉未成熟雄花愈伤组织进行辐射处理,然后置于人工气候箱进行黑暗培养,使辐射后的愈伤组织恢复生长;(3)香蕉未成熟雄花愈伤组织粗毒素筛选将恢复生长的辐射后的愈伤组织转至光照培养箱中培养12‑18天后,转移到含有30μg/ml香蕉枯萎病菌粗毒素的生长培养基中培养28‑32天;选择成活的愈伤组织转移至愈伤组织继代培养基中进行继代培养28‑32天,定期更换培养基;然后将愈伤组织接种于分化固体培养基上,诱导愈伤组织分化出芽;(4)分化芽粗毒素筛选分化培养的幼芽长至约0.5cm时,将幼芽转移至含有30μg/ml香蕉枯萎病菌粗毒素的分化培养基上培养;(5)香蕉生根苗粗毒素筛选选择步骤(4)后成活的分化幼芽转移至含有100μg/ml香蕉枯萎病菌粗毒素的生根培养基中培养35‑45天,然后选择生长健壮、根系发育良好的抗病突变苗转移至营养土种植培养,幼苗长至5片新叶时移栽至种质圃保存。
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