[发明专利]一种H-FABP和cTnI二联高效检测试纸的制备方法在审
申请号: | 201810224851.2 | 申请日: | 2018-03-19 |
公开(公告)号: | CN108445229A | 公开(公告)日: | 2018-08-24 |
发明(设计)人: | 张雷 | 申请(专利权)人: | 南京博天科智生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/577 |
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地址: | 210000 江苏省南京市江宁区龙眠大道*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种H‑FABP和cTnI二联高效检测试纸的制备方法,包括设在固定板上依次相连的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫;在硝酸纤维素膜上设有检测线抗体和质控线抗体;在金标垫上设有金标抗体,所述的样品垫为玻璃纤维棉制成的垫,所述的金标垫为羧化纤维素膜制成的垫,所述的金标抗体为显色抗体,检测线抗体为捕捉抗体,显色抗体与捕捉抗体为2株可互相配对形成夹心的抗人H‑FABP单克隆抗体,所述的金标抗体用40nm纳米金壳标记,所述金标垫上设有功能层,所述金标垫通过碳酸氢钠、牛血清白蛋白、酷蛋白以及聚氧烯月桂醚混合液浸泡。本发明通过特定功能层的金标垫和浸泡工艺,能够使得检测时样品之间避免相互干扰,能够大大提高检测精度。 | ||
搜索关键词: | 金标垫 金标抗体 抗体 硝酸纤维素膜 捕捉抗体 高效检测 显色抗体 功能层 检测线 样品垫 试纸 制备 牛血清白蛋白 玻璃纤维棉 单克隆抗体 混合液浸泡 碳酸氢钠 纤维素膜 依次相连 固定板 纳米金 吸收垫 月桂醚 质控线 检测 羧化 配对 浸泡 蛋白 | ||
【主权项】:
1.一种H‑FABP和cTnI二联高效检测试纸的制备方法,其特征在于,包括测试纸,所述测试纸包括:包括设在固定板上依次相连的样品垫(1)、金标垫(2)、硝酸纤维素膜(3)和吸收垫(4);在硝酸纤维素膜(3)上设有检测线抗体(5)和质控线抗体(6);在金标垫(2)上设有金标抗体,所述的样品垫(1)为玻璃纤维棉制成的垫,所述的金标垫(2)为羧化纤维素膜制成的垫,所述的金标抗体为显色抗体,检测线抗体为捕捉抗体,显色抗体与捕捉抗体为3株可互相配对形成夹心的抗人H‑FABP和cTnI单克隆抗体所述的金标抗体用40nm纳米金壳标记,所述金标垫上设有功能层,所述金标垫通过碳酸氢钠、牛血清白蛋白、酷蛋白以及聚氧烯月桂醚混合液浸泡;包括以下步骤:(1)采用以柠檬酸三钠为稳定剂和还原剂,制备出单分散的银纳米颗粒作为牺牲模板,通过置换反应获得胶体级、高分散的40nm金纳米壳;(2)调节纳米金壳溶液pH8.0~8.5,加入显色抗体与纳米金壳溶液反应,离心得沉淀,重悬沉淀,得金标抗体溶液;(3)将羧化纤维素膜预处理后,烘干,通过真空环境中通过红外喷涂设备分别将配制好的18%纯硝酸银、70%高分子保护剂、8%的司本80以及4%的环糊精喷涂至羧化纤维素膜好形成金标垫,然后用金标抗体溶液喷印;(4)金标垫的浸泡:金标垫由80%碳酸氢钠溶液、8%牛血清白蛋白、8%酷蛋白以及4%聚氧烯月桂醚混合液浸泡,然后烘干。(5)用捕捉抗体在已活化硝酸纤维素膜上喷划检测线,真空干燥;然后用羊抗鼠IgG在已活化硝酸纤维膜上喷划质控线,真空干燥;(6)按样品垫、金标垫、硝酸纤维膜、吸收垫顺序粘贴在单面压敏胶的塑料板上,切割,装入塑料卡,包装;其中,显色抗体与捕捉抗体为2株可互相形成夹心配对的抗人H‑FABP抗体。
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