[发明专利]一种谷物胚来源活性成分—纳米级外泌体的制备方法

摘要

本发明提供一种谷物胚来源活性成分—纳米级外泌体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：(1)谷物胚的获取；(2)谷物胚的脱脂；(3)谷物胚液的制取；(4)陶瓷膜除杂；（5）微滤除菌；上清液的提取；(6)纳滤浓缩；纳米级均质处理；（7）活性成分的络合及纳米级膜泡形成。纳米级外泌体的浓度和粒径分布如图5.本发明还提供一种谷物胚来源活性成分—纳米级外泌体的制备方法，所述谷物胚来源活性成分外泌体应用于肿瘤的治疗。本发明采用谷物胚制备外泌体，具有原料来源丰富，成本低，可大量生产等优点，使规模化利用外泌体成为现实。

主权项

1.一种谷物胚来源活性成分—纳米级外泌体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：步骤1，谷物胚的获取：选择优质小麦（玉米、大米）等机械脱胚得到的完整的谷物胚；粉碎到120目；步骤2，谷物胚的脱脂：亚临界萃取脱出胚芽油，得到胚芽粕；步骤3，谷物胚液的制取：以重量份计步骤2中获取的谷物胚加入10～20份蒸馏水，均质得到谷物胚液；步骤4，陶瓷膜除杂：将所述谷物胚液采用0.22 um ‑0.45 um陶瓷膜过滤除去残渣，收集滤过的一次上清液；步骤5，微滤除菌：将所述步骤4的一次上清液，采用0.1 um ‑0.22 um陶瓷膜过滤除去除菌，收集滤过的二次上清液（保留100 nm以下的活性成分）；步骤6，纳滤浓缩：将所述步骤5的二次上清液，采用30nm反渗透膜除去水和其它分子，浓缩5‑15倍，收集滤过的浓缩液（保留30 nm以上的活性成分）；步骤7，活性成分的络合及膜泡形成：在步骤6的浓缩液中加入1‑5%（相对于总体积）聚乙二醇（PEG‑400）或聚乙二醇（PEG‑800）的均质络合反应1‑5小时，即形成稳定谷物胚来源纳米级活性成分外泌体。