[发明专利]基于腺嘌呤/Au(III)复合物的多功能电化学传感器的构建方法及应用

摘要

本发明公开了基于腺嘌呤/Au(III)复合物的多功能电化学传感器的构建方法及应用，特点是包括以下步骤：(1)将腺嘌呤水溶液与HAuCl4水溶液剧烈振荡混合，温育，离心并用水洗涤，制备腺嘌呤/Au(III)聚合物；(2)将预处理后的Au电极浸入捕获探针(DNA)的缓冲液中室温孵育。接着在MCH中除去电极表面非特异性DNA，记为电极1。然后，通过TdT扩增获得富T DNA长链，标记为电极2。最后，将腺嘌呤/Au(III)复合物溶液置于上述电极上，通过氢键作用和碱基互补配对原则发生特异性杂交吸附作用，获得电极3。修饰电极用超纯水冲洗，氮气流下干燥；(4)最后，将制备的传感器应用于DNA相关酶活性及其小分子抑制剂检测。

主权项

1.基于腺嘌呤/Au(III)复合物的多功能电化学传感器的构建方法及应用，其特征在于该电化学生物传感器通过以下方法构建的：首先，利用腺嘌呤和HAuCl4水溶液合成腺嘌呤/Au(III)复合物；其次，预处理金电极，在piranha溶液(30％H2O2∶浓H2SO4，3∶7)中加热3～10分钟以去除任何先前的有机层，用氧化铝浆(0.3和0.05μm)，得到镜面状的样品，用超纯水超声波洗涤，氮气干燥，在0.1M H2SO4水溶液中循环伏安扫描，保持电压为‑0.3～+1.5V，时间5～15分钟，最后，将电极用水洗涤并在氮气流下干燥；再次，在金电极上修饰捕获探针(捕获DNA)，记为电极1；然后，将dTTP，TdT和TdT缓冲液滴加到修饰电极表面，实现扩增得到富T DNA长链，标记为电极2；最后，将合成的腺嘌呤/Au(III)复合物溶液滴至电极2上，通过氢键作用和碱基互补配对作用与TdT延长的富T DNA长链进行杂交吸附，获得电极3，即为所需电化学生物传感器。