[发明专利]一种通过蝾螈Oct4将人类血液细胞重编程为iPSC的方法有效
| 申请号： | 201810137319.7 | 申请日： | 2018-02-10 |
| 公开（公告）号： | CN108373998B | 公开（公告）日： | 2019-08-27 |
| 发明（设计）人： | 俞君英;张健;董成友;张颖 | 申请（专利权）人： | 安徽中盛溯源生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10 |
| 代理公司： | 合肥和瑞知识产权代理事务所(普通合伙) 34118 | 代理人： | 王挺 |
| 地址： | 230088 安徽省合肥市高*** | 国省代码： | 安徽;34 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明属于细胞领域，具体涉及一种通过蝾螈Oct4将人类血液细胞重编程为iPSC的方法，包括如下步骤，S1、获取红细胞祖细胞；S2、将包含蝾螈Oct4转录因子和其他转录因子的游离型载体导入S1中获取的红细胞祖细胞；S3、将S2中获取的含有游离型载体的红细胞祖细胞经多能干细胞诱导培养基培养，在无饲养层体系中诱导成重编程中间态细胞；S4、待完全诱导后，更换S3中所述的多能干细胞诱导培养基为多能干细胞培养基维持培养，获得蝾螈Oct4转录因子、其他转录因子表达消失且内源多能性基因POU5F1、NANOG、TRA‑1‑60与TRA‑1‑81表达激活的细胞，该细胞即为iPSC。本发明的有益效果是可以高效诱导产生无外源基因成分的hiPSC，适用于临床前研究和临床应用。 | ||
| 搜索关键词： | 转录因子 红细胞 重编程 祖细胞 细胞 多能干细胞诱导 人类血液细胞 游离型载体 培养基 诱导 多能干细胞 多能性基因 临床前研究 培养基培养 高效诱导 临床应用 饲养层 无外源 中间态 内源 激活 基因 | ||
【主权项】：
1.一种通过蝾螈Oct4将人类血液细胞重编程为iPSC的方法，其特征在于，包括如下步骤，S1、从人类血液细胞中抽提单核细胞，通过扩增培养基进行选择性培养，获取红细胞祖细胞；S2、将包含蝾螈Oct4转录因子和其他转录因子的游离型载体导入S1中获取的红细胞祖细胞；S3、将S2中获取的含有游离型载体的红细胞祖细胞经多能干细胞诱导培养基培养，在无饲养层体系中诱导成重编程中间态细胞；S4、待完全诱导后，更换S3中所述的多能干细胞诱导培养基为多能干细胞培养基维持培养，获得蝾螈Oct4转录因子、其他转录因子表达消失且内源多能性基因POU5F1、NANOG、TRA‑1‑60与TRA‑1‑81表达激活的细胞，该细胞即为iPSC；所述蝾螈Oct4转录因子表达产生的蛋白质所对应的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；所述其他转录因子选自NANOG、SOX2、LIN28A、KLF4、MYCL、MYCN、MYC、p53 knockdown、MIR302/367 cluster、ESRRB、REX1、GBX2、DLX4、ZSCAN10、ZSCAN4、TBX3、GLIS1、NR5A1/2、RARG、BMI1、KDM2B、TET1和SV40LT转录因子中的任意一种或者任意几种的组合。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于安徽中盛溯源生物科技有限公司，未经安徽中盛溯源生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201810137319.7/，转载请声明来源钻瓜专利网。
