[发明专利]一种桃儿七中两个具有抗肿瘤活性的双黄酮类化合物的制备方法及其应用

摘要

本发明涉及一种桃儿七中两个具有抗肿瘤活性的双黄酮类化合物的制备方法及其应用，桃儿七中两个具有抗肿瘤活性的新型双黄酮类化合物桃儿七双酮A和桃儿七双酮B制备方法包括以下步骤：制备粗提取物：硅胶柱色谱结合凝胶柱色谱初步分离：高效液相色谱法纯化：本发明方法稳定可靠、效率高、可快速从桃儿七中分离得到两个具有抗肿瘤活性的新型双黄酮类化合物Sinodiflavonoid A和Sinodiflavonoid B，并经活性实验结果表明对人宫颈癌细胞（HeLa）具有细胞毒活性，有效用于制备抗宫颈癌的药物，开拓了桃儿七的药用价值和新用途，提高了桃儿七的商业价值，经济和社会效益巨大。

主权项

一种桃儿七中两个具有抗肿瘤活性的双黄酮类化合物的制备方法，其特征在于，所述的桃儿七中两个具有抗肿瘤活性的新型双黄酮类化合物桃儿七双酮A（ Sinodiflavonoid A）和桃儿七双酮B （Sinodiflavonoid B）的化学结构式为：Sinodiflavonoid A (1)Sinodiflavonoid B (2)其制备方法包括以下步骤：1）、制备粗提取物：将桃儿七药材粉碎，过40目筛，得粗粉，粗粉用桃儿七重量6‑12倍的体积浓度为95%的乙醇回流提取3次，每次1–1.5 h，提取温度为90‑95℃，合并乙醇提取液，减压浓缩至呈无醇味的浓缩物，加浓缩物重量8‑12倍的蒸馏水混悬，再依次加入与混悬液等体积的溶剂乙酸乙酯萃取，45℃减压回收溶剂乙酸乙酯，得乙酸乙酯萃取部位的浸膏，即为桃儿七粗提取物；2）、硅胶柱色谱结合凝胶柱色谱初步分离：将桃儿七粗提取物经硅胶柱色谱初步分离，采用体积比为10:7、10:10、10:20的石油醚‑丙酮混合溶剂系统进行梯度洗脱，流速为10‑15 mLmin^‑1，收集石油醚‑丙酮10:10和10:20的洗脱流份，45℃减压浓缩，得到硅胶柱洗脱流份的浓缩物；将该浓缩物溶解于甲醇中，进行Sephadex LH‑20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，流速为1‑2 mLmin^‑1，收集含有目标成分Sinodiflavonoid A和Sinodiflavonoid B的流份，45℃减压浓缩，得含有目标成分的总样；3）、高效液相色谱法纯化：将含有目标成分的总样，溶解于甲醇中，过0.45 μm 滤膜，制备高效液相色谱；分别用体积浓度为70%的甲醇‑水作流动相进行梯度洗脱，流动相流速7.0‑10.0 mLmin^‑1，反相ODS柱长20 cm，内径2 cm，检测波长210nm或254 nm，记录色谱图，根据色谱图色谱峰的保留时间，分别收集Sinodiflavonoid A和Sinodiflavonoid B对应的色谱峰，45℃减压回收溶剂至干，分别得到Sinodiflavonoid A和Sinodiflavonoid B的单体化合物。