[发明专利]一种简单快速的植物基因组DNA的提取方法

摘要

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种简单快速的植物基因组DNA的提取方法。本发明基于CTAB提取法，改进了提取液配方，改变了样品磨碎方法，优化了操作步骤，可以方便快捷高通量地对植物基因组DNA进行提取，不需要研磨仪等仪器，液氮消耗极少，不需要酚等危险性较高的试剂。

主权项

1.一种简单快速的植物基因组DNA的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：在2mL EP管中放入一粒5mm钢珠或两粒3mm钢珠；将CTAB溶液放置于65℃烘箱中预热；步骤2：将新鲜幼嫩的植物叶片一端放入含有钢珠的EP管中，扣盖时利用EP管盖将管内外的植物组织切断，完成取样；步骤3：接着将EP管放置于EP管板的一端，取另一EP管板夹住EP管，然后将夹有EP管的EP管板在液氮中放置2min后取出；步骤4：上下剧烈晃动EP管板，直至植物组织破碎；步骤5：向EP管中加入500～800微升预热的CTAB溶液，上下轻柔颠倒至均匀，然后放置于65℃烘箱中20～60min，期间每隔10min取出EP管上下轻柔颠倒混匀；步骤6：然后在通风橱中向EP管中加入与步骤5中CTAB溶液等体积的抽提液，上下颠倒混匀，室温静置5min至分层；步骤7：12000rpm离心5min；步骤8：取上清至一新的1.5mL EP管中，加入等体积的异丙醇，-20℃放置20min；步骤9：12000rpm离心10～15min；步骤10：弃上清，用1mL体积分数70%或75%乙醇洗沉淀1～2次，弃上清，离心，用移液器吸去多余液体；步骤11：在超净工作台上打开EP管盖，吹风5～10min，然后加100微升含有RNaseA的蒸馏水溶解DNA。