[发明专利]谷糠源过氧化物酶抗肿瘤活性片段及其制备方法和应用

摘要

本发明提供了一种谷糠源过氧化物酶抗肿瘤活性片段及其制备方法和应用。所述片段的制备方法：Trizol法提取谷子幼苗组织mRNA，以mRNA为模板，经酶催化，反转录成cDNA。根据谷子抗肿瘤活性蛋白FMBP质谱鉴定结果，在Genebank中获得该蛋白基因序列，根据其不同的功能区域分别截短筛选，确定Ca2+结合位点的基因序列为抗肿瘤效应结构域，以此设计特定引物，以谷子cDNA为模板，PCR法扩增FMBP‑C基因序列；在该序列上下游分别引入BamH I和HindⅢ酶切位点，与pMal‑s载体连接，构建pMal‑s‑FMBP‑C重组质粒，转入E.coli DH5α感受态细胞，筛选获得阳性转化子；经IPTG诱导表达目的蛋白，将其亲和纯化、脱盐和浓缩，MTT法检测其抗肿瘤和逆转肿瘤多药耐药的功能，结果表明该活性片段具有显著的抗肿瘤及逆转肿瘤多药耐药的活性。

主权项

1.一种谷糠源过氧化物酶抗肿瘤活性片段，其特征在于具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。