[发明专利]对宿主细胞蛋白质的蛋白质组分析

摘要

本文中公开了用于在产物，例如重组蛋白，例如抗体的产生期间检测和/或定量宿主细胞蛋白质的方法和组合物。

主权项

1.快速分析样品的简单方法，例如以提供蛋白质风险的评估(例如，所述蛋白质在制剂中作为污染物存在时呈现的风险，例如，待施用于受试者的制剂，例如药物制剂)，所述方法包括：a)在使所述样品中的所述蛋白质变性的条件，例如变性剂浓度下，于10‑30℃，例如18‑26℃，例如20±3℃，20±2℃，20±1℃，或20℃的温度提供样品混合物，例如形成和/或维持样品混合物，所述样品混合物包含：i)经由工艺产生的所述样品，其包含所述蛋白质和任选地产物(例如，重组多肽，例如抗体、酶或细胞因子)；和ii)变性剂，例如脱氧胆酸盐和尿素；b)在所述酶维持实质活性并与所述蛋白质反应，例如裂解所述蛋白质以提供蛋白质消化产物的条件下提供样品/酶混合物，例如，形成和/或维持样品/酶混合物，所述样品/酶混合物包含：i)样品混合物(例如，来自(a)的样品混合物的等分试样)；和ii)酶制剂，其包含所述蛋白质为底物的酶，例如蛋白水解酶，例如在所述样品混合物的情况下在预先选择或限定的靶位点处切割蛋白质的酶，例如胰蛋白酶、lysC、GluC或AspN；c)使用层析，例如1维层析分离所述蛋白质消化产物，提供所述蛋白质消化产物的身份，例如通过质谱法，例如LC/MS，并使用一种或多种蛋白质消化产物来提供与所述蛋白质消化产物相关的蛋白质的身份；并且d)将蛋白质风险得分分配给所述样品中鉴定的蛋白质，从而分析所述样品并且提供蛋白质风险的评估。