[发明专利]病毒载体编码异构水解醇的相对效力测定在审

专利信息
申请号: 201780040688.8 申请日: 2017-04-28
公开(公告)号: CN109689033A 公开(公告)日: 2019-04-26
发明(设计)人: 琳达·科托 申请(专利权)人: 星火治疗有限公司
主分类号: A61K31/07 分类号: A61K31/07;C12N9/18;C12N15/86;C12Q1/00
代理公司: 上海胜康律师事务所 31263 代理人: 李献忠;邱晓敏
地址: 美国宾夕*** 国省代码: 美国;US
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摘要: 提供了用于测定异构水解酶蛋白的功能和/或活性和/或效力的方法。
搜索关键词: 异构 病毒载体编码 水解酶蛋白 效力测定 水解
【主权项】:
1.一种测量异构水解酶活性的方法,其包括:(a)在允许细胞转导的条件下,使表达卵磷脂视黄醇酰基转移酶(LRAT)的细胞与包含编码异构水解酶蛋白的转基因的腺相关病毒(AAV)载体接触;(b)在允许表达所编码的所述异构水解酶蛋白的条件下孵育转导的细胞;(c)收集并裂解转导的所述细胞以产生包含所编码的所述异构水解酶蛋白的提取物;(d)将所述提取物与底物一起孵育一段时间,并在允许所述底物被所述异构水解酶蛋白转化为反应产物的条件下进行;(e)将所述反应产物进行柱色谱法处理,从而产生柱色谱法纯化的反应产物;以及(f)对所述柱色谱法纯化的反应产物进行质谱法处理,从而定量所述反应产物,其中所述反应产物的量反映异构水解酶活性,从而测量异构水解酶活性。
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