[发明专利]可用于纳米孔系统的位点特异性生物缀合方法和组合物

摘要

本公开涉及提供蛋白(诸如孔形成蛋白α‑溶血素)与生物分子(诸如DNA聚合酶)的快速、有效的位点选择性缀合的方法和相关组合物，以及此类位点选择性蛋白‑生物分子缀合物在纳米孔装置和方法中的用途。

主权项

1.制备蛋白和生物分子的缀合物的方法，所述方法包括：(a) 在合适的反应条件下，使蛋白与式(I)的化合物接触，其中所述蛋白包含硫醇基团其中，A是硫醇反应性基团；LA是接头；且X是点击化学反应性基团；由此形成式(II)的修饰的蛋白其中S是所述蛋白的硫醇基团的硫原子；(b) 使式(II)的修饰的蛋白与式(III)的化合物接触其中，B是反应性基团；LB是接头；且Y是点击化学反应性基团，其经历与式(II)的化合物的同源点击化学反应性基团X的点击化学反应；由此形成结构式(IV)的修饰的蛋白(c) 在合适的反应条件下使式(IV)的修饰的蛋白与生物分子接触，其中所述生物分子包含反应性基团Z，其中Z能够与反应性基团B形成共价键，由此形成式(V)的缀合物。