[发明专利]一种以诱惑红为探针的共振瑞利散射法测定壳寡糖含量的方法

摘要

本发明涉及一种以诱惑红为探针的共振瑞利散射法测定壳寡糖含量的方法，属于大分子检测领域。本发明于BR缓冲溶液中，壳寡糖和诱惑红缔合后，散射值明显增大，并在470.5nm处有最大散射峰，且在一定的浓度范围内，其散射值随壳寡糖含量的增加而增大，并且在一定浓度范围内呈线性关系。据此，建立了一种壳寡糖的测定方法，其具有试剂廉价，灵敏度高，重现性好和操作方便等优点，适合在实际应用中推广使用。

主权项

1.一种以诱惑红为探针的共振瑞利散射法测定壳寡糖含量的方法，其包括下述步骤：1)绘制壳寡糖的标准曲线在一系列10mL比色管中，按先后顺序分别加入BR缓冲液1.00mL，一定浓度梯度的壳寡糖标准液，1mL浓度为1.0×10‑4mol/L诱惑红，以蒸馏水定容后充分摇匀；同时以试剂空白作参比，在470.5nm处测RRS，以ΔI‑c作线性趋势图得标准曲线；2)20μg/mL的样品工作液的制备：称取一定量待检测样品的胶囊壳，使用冰醋酸溶解并将其定容得到样品储备液，用漏斗脱脂棉过滤储备液，滤液经6000r/min，离心机离心20min，取上清液2.5mL于100mL容量瓶，定容，得浓度为20.00μg/mL的样品工作液；3)样品中壳寡糖含量确定：取样品工作液2mL，按步骤1)检测方法进行测定，在470.5nm处测定其RRS，并计算ΔI＝I‑I0，将ΔI代入线性回归方程求得样品中壳寡糖的含量，同时做加标回收试验。