[发明专利]一种脾氨肽内多肽的提取方法

摘要

本发明公开了脾氨肽内多肽的提取方法，包括以下步骤，步骤一，试剂配制，配制流动相A、流动相B；步骤二，样品处理，将脾氨肽加入到起始流动相中，得到样品溶液；步骤三，分离纯化。本发明具有以下优点和效果：采用色谱分离技术，色谱柱吸附脾氨肽内的多肽、糖、游离氨基酸、核苷酸等物质，梯度洗脱过程中，将多肽从色谱柱上集中洗脱出来；在色谱分离过程中，选用合适的流动相以及色谱柱，能将脾氨肽内的多肽集中洗脱，多个色谱峰之间间隔较大，达到了分离纯化脾氨肽内多肽、分离效果好、操作简单的效果。

主权项

一种脾氨肽内多肽的提取方法，其特征在于，包括以下步骤步骤一，试剂配制，配制流动相A、流动相B，流动相A内溶剂为水、溶质为质量百分比浓度为0.1％的甲酸，流动相B内溶剂为乙腈、溶质包括质量百分比浓度为0.1％的甲酸和质量百分比浓度为0.1％的环己醚；步骤二，样品处理，将脾氨肽加入到起始流动相中，得到样品溶液；步骤三，分离纯化，色谱条件：色谱柱内填料颗粒为多孔硅胶，填料颗粒直径为5μm，色谱柱内径为2.1mm，柱长为75mm，柱温40℃，梯度洗脱0min‑13min‑13.5min‑26min‑35min,流动相B 5％‑11.2％‑15.8％‑36％‑60％；流速0.5ml/min，进样体积为20μL，检测波长214nm，收集出峰时间为16.060‑16.462min、23.072‑24.022min、29.968‑31.451min的色谱峰，得到分离出来的多肽。