[发明专利]一种基于微电极阵列制备酶生物传感器的方法

摘要

本发明公开了一种基于光刻蚀技术制备微电极阵列并修饰以导电基元及分子识别传感涂层制备电化学酶生物传感器的制备方法，涉及高分子材料科学、光刻蚀技术、生物免疫技术、电化学传感器等领域。本发明中采用的光刻胶能够实现超高长径比微电极阵列的制备，在二维平面结构的基础上开发三维结构，大大增加涂层的比表面积，为制备高灵敏度的生物传感器提供了良好的微环境。本发明中采用的共价固定分子识别基元酶的方法实现了酶的有效固定，将高比表面积的优势进一步扩大，所构建的传感器对于待分析物具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。光刻蚀技术与电化学传感器的结合，可广泛应用于免疫分析并拓展应用于食品安全、生物医药及环保监测等领域。

主权项

一种基于微电极阵列制备酶生物传感器的方法，光刻微电极阵列的制备、导电层的制备及酶生物传感器的构建的具体步骤如下：(1)光刻微电极阵列的制备预处理基材后旋涂一层增粘剂，随后将负性光刻胶涂覆其上，进行前烘、曝光、后烘、显影、坚膜工艺，完成将掩膜板上图形转移到基材表面的过程，得到所需要的阵列图案。(2)导电层的制备在(1)的基础上引入导电基元，在微电极阵列表面形成均匀的导电层；(3)酶生物传感器的构建在(2)的基础上制备具有特异性分子识别能力的生物活性层，首先将(2)制备的导电微电极阵列浸于具有连接作用的中间体溶液中浸泡，取出后用超纯水冲洗并用氮气(N₂)吹干；随后放入缓冲溶液配置的酶溶液中，前期共价连接的中间体能够与酶发生脱水缩合反应，从而实现酶的有效固定，取出时用PBS及超纯水冲洗并通氮气(N₂)干燥，即得到具有特异性检测型的酶生物传感器。