[发明专利]小鼠X/Y精子分离精液的生产方法及应用

摘要

本发明小鼠X/Y精子分离精液的生产方法及应用，属于生物领域，它是应用小鼠X、Y精子DNA含量的差异，通过流式细胞方式分离X和Y精子，然后制成性别控制精液，用于小鼠的体外受精、人工受精和胞质内精子注射，按照需要定向繁育雄鼠或雌鼠，或者通过小鼠X/Y精子分离精液生产性控胚胎，再进行胚胎移植，加快特殊品系小鼠的繁育速度。通过添加上机分离液来保护小鼠的鲜精，有效的保护了小鼠精子的活力，提高分离效率。

主权项

1.一种小鼠X/Y精子分离精液的生产方法，其特征在于：它包括以下步骤：(1)、配制X/Y精子上机分离液，pH值7.0-7.4，由以下组分组成：Tris三羟甲基氨基甲烷 270～320mM柠檬酸 70～90mM果糖 60～80mM；(2)、小鼠X/Y精子分离精液的生产方法，包括以下步骤：(a)、将输精管和附睾放入预热的1ml上机分离液中，用镊子轻轻将精子挤出来；在37℃的培养箱中将精子及输精管和附睾组织共培养10～15min；(b)、用针从培养皿中将输精管和附睾组织挑出，使精子与上机分离液混匀，用移液枪把混合液转移到5ml离心管中；(c)、检测新鲜精液的浓度和活力；(d)、用10ug/ml Hochest 33342在37℃温水浴中染色45min；(e)、根据小鼠X/Y精子分离的DNA含量差异设定流式细胞分离机参数，通过流式细胞分离机分离X和Y精子；(f)、根据分离精子累计显示，取分离的X精子和Y精子各40～50万，用小鼠体外受精液回收分离好的精子；(g)、检测分离后小鼠精液的浓度和活力；(h)、检测分离后小鼠精液的纯度。