[发明专利]减小大小的自递送RNAi化合物

摘要

本发明涉及减小大小的自递送RNAi化合物。本发明涉及具有最小双链区的RNAi构建体以及它们在基因沉默中的应用。与本发明相关的RNAi构建体包含8‑14个核苷酸的双链区和多种化学修饰，并且在基因沉默中非常高效。

主权项

1.分离的不对称核酸分子，其包含

最小长度为16个核苷酸的引导链，以及负载链，它们形成具有双链区和单链区的双链核酸，所述双链区长度为8‑15个核苷酸，所述单链区长度为5‑12个核苷酸，其中所述负载链与亲脂基团连接，其中所述双链核酸中至少40％的核苷酸被修饰，并且其中所述单链区具有至少2个硫代磷酸酯修饰。

2.权利要求1的分离的不对称核酸分子，其中所述引导链的1位被5’磷酸化。

3.权利要求1的分离的不对称核酸分子，其中所述引导链的1位被2’O‑甲基修饰并被5’磷酸化。

4.分离的双链核酸分子，其包含

15‑21个核苷酸长的较长链，其与miRNA序列互补，

8‑16个核苷酸长的较短链，其在3’末端与亲脂基团连接，

其中所述较长链和负载链形成具有双链区和单链区的双链核酸分子，其中所述较长链具有2‑13个核苷酸长的3’单链区，其包含至少2个硫代磷酸酯修饰，并且至少50％的核苷酸被修饰。

5.分离的双链核酸分子，其包含

17‑21个核苷酸长的引导链，其与靶基因互补，

8‑16个核苷酸长的负载链，其在3’末端与亲脂基团连接，

其中所述引导链和所述负载链形成具有双链区和单链区的双链核酸分子，其中所述引导链具有2‑13个核苷酸长的3’单链区，所述单链区中的每个核苷酸都具有硫代磷酸酯修饰，其中所述引导链具有5’磷酸酯修饰，并且其中所述双链区中至少50％的C和U核苷酸包含至少一个2’O‑甲基修饰或2’‑氟代修饰。

6.分离的双链核酸分子，其包含

17‑21个核苷酸长的引导链，其与靶基因互补，

10‑16个核苷酸长的负载链，其在3’末端与亲脂基团连接，

其中所述引导链和所述负载链形成具有双链区和单链区的双链核酸分子，其中所述引导链具有5‑11个核苷酸长的3’单链区，所述单链区中的至少2个核苷酸具有硫代磷酸酯修饰，其中所述引导链具有5’磷酸酯修饰，并且其中所述双链区中至少50％的C和U核苷酸被2’O‑甲基修饰或2’‑氟代修饰。

7.分离的双链核酸分子，其包含

17‑21个核苷酸长的引导链，其与靶基因互补，

8‑16个核苷酸长的负载链，其在3’末端与亲脂基团连接，

其中所述引导链和所述负载链形成具有双链区和单链区的双链核酸分子，其中所述引导链具有6‑8个核苷酸长的3’单链区，所述单链区中的每个核苷酸都具有硫代磷酸酯修饰，其中所述引导链具有5’磷酸酯修饰，其中所述负载链包含至少2个硫代磷酸酯修饰，其中所述双链区中至少50％的C和U核苷酸包含2’O‑甲基修饰或2’‑氟代修饰，并且其中所述双链核酸分子的一个末端是平末端或包含1‑2个核苷酸的突出端。

8.分离的双链核酸分子，其包含

17‑21个核苷酸长的引导链，其与靶基因互补，

8‑16个核苷酸长的负载链，其在3’末端与亲脂基团连接，

其中所述引导链和所述负载链形成具有双链区和单链区的双链核酸分子，其中所述引导链具有3’单链区，所述单链区中的每个核苷酸都具有硫代磷酸酯修饰，其中所述引导链具有5’磷酸酯修饰，其中所述引导链中11‑18位的每个C和U核苷酸都具有2’O‑甲基修饰，其中所述负载链的每个核苷酸都被2’O‑甲基修饰，并且其中所述双链核酸分子的一个末端是平末端或包含1‑2个核苷酸的突出端。

9.分离的双链核酸分子，其包含

17‑21个核苷酸长的引导链，其与靶基因互补，

8‑15个核苷酸长的负载链，其在3’末端与亲脂基团连接，其中所述亲脂基团选自胆固醇和具有5‑7个或9‑18个碳长度的C17多碳链的固醇类分子，

其中所述引导链和所述负载链形成具有双链区和单链区的双链核酸分子，其中所述引导链具有3’单链区，所述单链区中的每个核苷酸都具有硫代磷酸酯修饰，其中所述引导链具有5’磷酸酯修饰，其中所述引导链中11‑18位的每个C和U核苷酸都具有2’O‑甲基修饰，其中所述引导链中2‑10位的每个C和U核苷酸具有2’F修饰，其中所述负载链的每个核苷酸都被2’O‑甲基修饰，并且其中所述双链核酸分子的一个末端是平末端或包含1‑2个核苷酸的突出端。

10.分离的核酸分子，其包含

与靶基因互补的引导链，

在3’末端与亲脂基团连接的负载链，

其中所述引导链和所述负载链形成具有双链区和单链区的核酸分子，其中所述引导链具有2‑13个核苷酸长的3’单链区，所述单链区中的每个核苷酸都具有硫代磷酸酯修饰，其中所述引导链具有5’磷酸酯修饰，其中所述双链区中至少50％的C和U核苷酸包含至少一个2’O‑甲基修饰或2’‑氟代修饰，并且其中所述双链核酸分子的一个末端是平末端或包含1‑2核苷酸的突出端。