[发明专利]从头合成维生素B12

摘要

本发明提供了一种从头合成维生素B12的大肠杆菌重组菌及其构建方法与应用。具体地，本发明以大肠杆菌为出发菌株，构建了包含HBA基因模块、HBAD基因模块、CBAD基因模块和Cbi基因模块的工程菌，所述工程菌不仅高效快速生产B12(产率高出现有技术至少50倍)，甚至可以以简单化合物的原料，从头合成维生素B12。

主权项

1.一种用于生产维生素B₁₂或其前体的工程菌，其特征在于，所述工程菌为大肠杆菌，并且所述工程菌含有外源的基因模块(gene module)，所述的基因模块包括：(a)HBA基因模块，所述HBA基因模块表达用于生物合成HBA的基因；较佳地，所述的用于生物合成HBA的基因包括：cobA、cobI、cobG、cobJ、cobM、cobF、cobK、cobL、cobH；(b)HBAD基因模块，所述HBAD基因模块表达用于以HBA为原料，生物合成HBAD的基因；较佳地，所述的用于生物合成HBAD的基因包括：cobB基因；(c)CBAD基因模块，所述CBAD基因模块表达用于以HBAD为原料，生物合成CBAD的基因；较佳地，所述的用于生物合成CBAD的基因包括：cobN基因、cobS基因、cobT基因、和/或cobW基因；和(d)Cbi基因模块，所述Cbi基因模块包含：(i)第一基因模块，所述的第一基因模块表达用于以L‑苏氨酸为原料，生物合成APP的基因，其中，所述的用于生物合成APP的基因包括：L‑苏氨酸激酶编码基因、和L‑苏氨酸磷酸脱羧酶编码基因；(ii)第二基因模块，所述的第二基因模块表达用于以CBAD为原料，生物合成腺苷钴啉胺酸(adenosylcobyric acid)；和(iii)第三基因模块，所述的第三基因模块表达用于以腺苷钴啉胺酸和APP为原料，生物合成腺苷钴啉醇酰胺磷酸(adenosylcobinamide phosphate)的基因。