[发明专利]一种基于原子力显微镜的红细胞力学特征的检测方法

摘要

本发明提供了一种基于原子力显微镜的红细胞力学特征的检测方法，涉及生物物理学技术领域。本发明采取的技术方案是使用细胞爬片固定红细胞，具体步骤为：红细胞悬液制备、细胞爬片预处理、原子力显微镜样品制备、使用原子力显微镜在液态环境下检测红细胞力学特征。用细胞爬片固定红细胞，可保持红细胞仍然处于生理状态，对红细胞的正常形态和功能的维持作用是非常明显的。常规使用的细胞爬片经过必要的消毒和无害化处理，对红细胞没有附加的药物影响和毒害，不会影响细胞的形态和功能。经过细胞爬片处理的红细胞，既能保证红细胞稳定地附着住，又能单一检测出红细胞的力学特征而不会有其他影响和干扰，能够反映细胞真实的生理特征。

主权项

1.一种基于原子力显微镜的红细胞力学特征的检测方法，其特征在于使用多聚赖氨酸细胞爬片固定红细胞，具体包括以下步骤：①红细胞悬液制备：EDTA抗凝采血1mL，25℃条件下3500rpm离心5min，弃上层血浆及白细胞层，缓慢轻轻加入10mLPBS缓冲液，轻柔洗涤红细胞，25℃条件下3500rpm离心5min，弃上清及白色沉淀表层，重复洗涤红细胞3次，最后加入PBS缓冲液将红细胞稀释50倍，制成红细胞悬液；②细胞爬片预处理：将细胞爬片置于适的培养板中，于Hank溶液浸泡30min以上，使用前将Hank溶液吸干净；③原子力显微镜样品制备：取200μL红细胞悬液，滴加于细胞爬片中央，静置1-2min，用Hank溶液轻轻冲洗掉没有固定的红细胞；④使用原子力显微镜在液态环境下检测红细胞力学特征。