[发明专利]一种鸡全血简便快速DNA提取方法有效
| 申请号： | 201711265226.4 | 申请日： | 2017-12-05 |
| 公开（公告）号： | CN107841498B | 公开（公告）日： | 2021-05-28 |
| 发明（设计）人： | 王树艳;沈前程;李军成;凌丁 | 申请（专利权）人： | 广西农业职业技术学院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 广州市红荔专利代理有限公司 44214 | 代理人： | 李彦孚;何承鑫 |
| 地址： | 530000 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开一种鸡全血简便快速DNA提取方法，其提取方法包括将鸡全血加入抗凝剂后，再加入裂解液中混合，于56～60℃水溶锅放置20～30min，加入分离液，于70～80℃水溶锅放置20～30min后离心，取上清液转移到另一EP管中，再加入析出液，离心，留沉淀，加入洗涤液后混匀，离心；小心弃上清，收集沉淀室温干燥，加入TB缓冲液，即得鸡DNA提取液。本发明提取的DNA纯度和DNA完整性都能达到试验要求，浓度和纯度优于现有试剂盒提取的DNA。结合在鸡分子育种方面的应用，可证明该方法是一种成本低，操作简单，环境友好型的DNA提取方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 鸡全血 简便 快速 dna 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种鸡全血简便快速DNA提取方法，包括样本准备，样本裂解，样本分离DNA沉淀，DNA洗涤和制备DNA，其特征在于，具体制备步骤如下：（1）样本准备：取鸡全血，加入抗凝剂，获得鸡抗凝血；（2）样本裂解：将鸡抗凝血加入裂解液中混合，于56～60℃水溶锅放置20～30min，所述的鸡抗凝血与裂解液质量比为1：2.5，得鸡裂解血；（3）样本分离DNA沉淀：将鸡裂解血加入分离液，于70～80℃水溶锅放置20～30min后，在4000 rpm离心机中离心分离10～15 min，取上清液转移到另一EP管中，得鸡分离血；（4）DNA洗涤：在鸡分离血中加入析出液，于4000 rpm离心机中离心分离1～2 min，留沉淀，加入洗涤液后混匀，得鸡初级DNA提取液；（5）制备DNA：将鸡初级DNA提取液于4000 rpm离心机中离心分离1～2 min；弃上清，收集沉淀室温干燥，加入TB缓冲液，即得鸡DNA提取液。
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