[发明专利]具有抗抑制活性的重组木聚糖酶XynB及其应用在审
申请号: | 201711041119.3 | 申请日: | 2017-10-30 |
公开(公告)号: | CN107619823A | 公开(公告)日: | 2018-01-23 |
发明(设计)人: | 莫毅;梁方方;蒋和生;叶健;郭亚芬 | 申请(专利权)人: | 梁方方 |
主分类号: | C12N9/24 | 分类号: | C12N9/24;A23K20/189;A23K10/30;A23K30/18 |
代理公司: | 广州市越秀区海心联合专利代理事务所(普通合伙)44295 | 代理人: | 王洪娟,马赟斋 |
地址: | 530000 广西壮族自治*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | 本发明公开了具有抗抑制活性的重组木聚糖酶XynB,由以下构建方法制得取小麦全基因组,并采用以下特异引物扩增小麦的Xyn B基因第三外显子内的活性位点序列,电泳切胶回收DNA片段经限制性内切酶EcoR V和EcoR I酶切后与载体pET30a+构建重组表达载体,经转化菌转化后获得重组质粒pET30a‑Xyn B,重组质粒pET30a‑Xyn B转化至工程菌,经培养后获取单克隆菌落,转至培养基中培养并诱导蛋白表达,获得重组木聚糖酶XynB。 | ||
搜索关键词: | 具有 抑制 活性 重组 聚糖 xynb 及其 应用 | ||
【主权项】:
具有抗抑制活性的重组木聚糖酶XynB,其特征是,由以下构建方法制得:取小麦全基因组,并采用以下特异引物扩增小麦的Xyn B基因第三外显子内的活性位点序列,电泳切胶回收DNA片段经限制性内切酶EcoR V和EcoR I酶切后与载体pET30a+构建重组表达载体,经转化菌转化后获得重组质粒pET30a‑Xyn B,重组质粒pET30a‑Xyn B转化至工程菌,经培养后获取单克隆菌落,转至培养基中培养并诱导蛋白表达,获得重组木聚糖酶XynB;其中,所述的特异引物为:正向引物:5’‑TCGATATCATGCAGCTGGACAACGCCTT‑3’,划线部分为EcoR V限制性内切酶位点,反向引物:5’‑TCGAATTCTGCGTCCGTCTTCCACTCCC‑3’,划线部分为EcoR I限制性内切酶位点。
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