[发明专利]一种基于气相色谱-串联质谱的烟叶马来酰肼及其糖苷的定量分析方法

摘要

本发明公开了一种基于气相色谱‑串联质谱的烟叶马来酰肼及其糖苷的定量分析方法，所述的定量分析方法包括以下步骤：1）样品前处理：准确称取烟叶样品粉末，然后进行离心冷冻干燥，取出冻干样品，加入吡啶和MSTFA，涡旋混合，恒温静置硅烷化30 min，得到衍生后的待测样品，转至气相色谱‑串联质谱仪进行分析；2）标准曲线绘制；3）样品分析：将步骤（1）处理后的待测样品进行气相色谱‑串联质谱分析，得到待测样品中马来酰肼及其糖苷的色谱质谱峰面积，输入校准曲线方程，计算得到相对应的物质浓度。本发明通过创造性的检测烟叶中马来酰肼自由态及马来酰肼糖苷结合态的含量，极大的提高了分析结果的准确性，方法简便、效率高。

主权项

1.一种基于气相色谱‑串联质谱的烟叶马来酰肼及其糖苷的定量分析方法，其特征在于包括以下步骤：1）样品前处理：准确称取烟叶样品粉末，当所述的烟叶样品粉末为新鲜烟叶样品粉末时，称取量为100mg；当所述的烟叶样品粉末为烤后烟叶样品粉末时，称取量为10mg； 然后进行离心冷冻干燥0.5~1.5h，取出冻干样品，加入200±100μL 吡啶和80±40μL MSTFA，涡旋混合30s，37℃恒温静置硅烷化30min，得到衍生后的待测样品，转至气相色谱‑串联质谱仪进行分析；2）标准曲线绘制：以甲醇为溶剂，配置10μg/mL 的马来酰肼及其糖苷的混合标准溶液，然后分别移取5、10、20、40、60、80、100、200、300μL 标准混合溶液至离心管，再分别称取不含马来酰肼及其糖苷的烟叶样品粉末至离心管作为样品基质，当所述的烟叶样品粉末为烤后烟叶样品粉末时，称取量为10mg；当所述的烟叶样品粉末为新鲜烟叶样品粉末时，称取量为100mg；制成不同浓度梯度的待测样本，然后将待测样本分别进行步骤1）中所述的离心冷冻干燥和萃取衍生处理，再转至气相色谱‑串联质谱进行分析，得到每个浓度梯度样本对应的色谱质谱峰面积，将得到的峰面积和其对应的浓度梯度进行线性拟合，得到校准曲线方程和线性相关系数；3）样品分析：将步骤1）处理后的待测样品进行气相色谱‑串联质谱分析，得到待测样品中马来酰肼及其糖苷的色谱质谱峰面积，输入校准曲线方程，计算得到相对应的物质浓度；色谱分析条件为：色谱柱为30m×0.25mm×0.25μm的DB‑5MS，程序升温条件为从80℃开始，以5℃/min 升至150℃，再以20℃/min 升至240℃，保持7 min，然后以20℃/min升至280℃，保持8min；进样口温度为250℃；进样体积为1μL；载气为氦气；柱流量为1.1mL/min；分流比为20:1；质谱分析条件为：传输线温度为260℃；离子源温度230℃；溶剂延迟时间为11.5min；多反应离子检测条件为：。