[发明专利]一种基因重组蜘蛛丝蛋白牙齿嵌体及其制备方法

摘要

本发明提供一种基因重组蜘蛛丝蛋白牙齿嵌体及其制备方法，包括基因重组蜘蛛丝蛋白溶液的制备、基因重组蜘蛛丝蛋白溶液冷冻干燥、基因重组蜘蛛丝蛋白溶解于六氟异丙醇或者水中、基因重组蜘蛛丝蛋白棒材制备、切削加工。通过控制基因重组蜘蛛丝蛋白溶液制备参数、干燥固化等参数以及掺杂固相增强颗粒，可以控制基因重组蜘蛛丝蛋白牙齿嵌体的力学性能，获得与人体骨骼力学参数、牙齿咬合匹配的优良性能牙齿嵌体，并且本发明获得的牙齿嵌体与人体兼容，不会产生炎症问题。

主权项

1.一种基因重组蜘蛛丝蛋白牙齿嵌体的制备方法，其特征在于，所述制备方法至少包括：1)将经过发酵并表达基因重组蜘蛛丝蛋白的工程菌溶解在一定浓度的缓冲溶液中，然后破碎所述工程菌，并进行离心，收集第一上层清液；2)对所述第一上层清液进行保温，并继续进行离心，收集第二上层清液；3)在所述第二上层清液中加入镍层析柱，利用第一清洗溶液洗去吸附在所述镍层析柱上的杂蛋白，再利用第二清洗溶液洗脱吸附在所述镍层析柱上的目标基因重组蜘蛛丝蛋白，并收集目标基因重组蜘蛛丝蛋白溶液；4)将收集的所述目标基因重组蜘蛛丝蛋白溶液装入透析袋中进行透析，之后离心，收集第三上层清液，以获得所需的基因重组蜘蛛丝蛋白溶液；5)利用冷冻干燥工艺，将步骤4)获得的所述基因重组蜘蛛丝蛋白溶液转变为无水基因重组蜘蛛丝蛋白；6)将所述无水基因重组蜘蛛丝蛋白溶解于六氟异丙醇或者水中，获得基因重组蜘蛛丝蛋白的六氟异丙醇溶液或水溶液；7)将所述基因重组蜘蛛丝蛋白的六氟异丙醇溶液或者水溶液注入特定的模具中，并依次通过甲醇处理和风干工艺制成基因重组蜘蛛丝蛋白棒材，再将所述基因重组蜘蛛丝蛋白棒材切削加工成所需的牙齿嵌体。