[发明专利]一种DNA-MarkerI分子量标准及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201710990607.2 | 申请日： | 2017-10-23 |
| 公开（公告）号： | CN107653240B | 公开（公告）日： | 2019-12-03 |
| 发明（设计）人： | 吕新;李玥仁;陈丽华;刘兰英;黄薇 | 申请（专利权）人： | 福建省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N15/11;C12N15/64 |
| 代理公司： | 11569 北京高沃律师事务所 | 代理人： | 刘奇<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
| 地址： | 350003 *** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种制备DNA Marker I分子量标准的方法，包括以下步骤：将9个不同长度的DNA片段分配至三个质粒中；限制性内切酶进行酶切，然后混合酶切片段后即得DNA Marker I分子量标准。本发明的方法解决了现有技术酶切DNA片段方法制备DNA Marker各条带之间亮度不均一的问题，即通过增加不同DNA片段的拷贝数以及在质粒酶切产物的混合重量比例，达到DNA片段亮度一致，从而解决批次间质量不稳定的问题。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 dna markeri 分子量 标准 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种制备DNA Marker I分子量标准的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n1)9个不同长度的DNA片段分配至三个质粒中；/n2)将分配后的三个质粒用限制性内切酶进行酶切，然后混合酶切片段后即得DNAMarker I分子量标准；其中所述9个不同长度的DNA片段分别为2400bp，2000bp，1600bp，1200bp，1000bp，800bp，600bp，400bp，200bpDNA片段；/n所述分配后的三个质粒分别为质粒1基因工程质粒载体pBS-7.2kb，核苷酸如序列表中SEQ ID NO:4所示；质粒2为基因工程质粒载体pBS-8kb，核苷酸如序列表中SEQ ID NO:5所示；质粒3为基因工程质粒载体pBS-4.8kb，核苷酸如序列表中SEQ ID NO:6所示；/n所述步骤1)中9个不同长度的DNA片段分配至三个质粒的拷贝数分别为：质粒1包含2400bp片段、拷贝数1，1200bp片段、拷贝数2，600bp片段、拷贝数4；质粒2包含2000bp片段、拷贝数1，1000bp片段、拷贝数4，200bp片段、拷贝数10；质粒3包含1600bp片段、拷贝数1，800bp片段、拷贝数2，400bp片段、拷贝数4；/n所述步骤2)的限制性内切酶是EcoRI；/n所述步骤2)中质粒1～质粒3的酶切产物的混合重量比例为1:1.2:1～1:2:1。/n
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