[发明专利]一类潜在的绿色的有效防治南方根结线虫的马兜铃酸及其衍生物类化合物的分离筛选方法

摘要

本发明涉及一类潜在的绿色有效防治南方根结线虫的马兜铃酸及其衍生物类化合物的分离筛选方法，主要包括以下步骤：将马兜铃属植物枝干剪成小段、烘干、粉碎、甲醇提取、最后经石油醚、氯仿萃取，浓缩，取石油醚和氯仿浸膏分别进行洗脱，采用反复柱层析、沉淀和重结晶的方法进行分离纯化，针对分离获得的化合物进行活性筛选，得到3种具有杀线虫活性的化合物。采用本发明方法工艺流程较为简单，获得的三种杀线虫活性化合物作为植物次生代谢产物，是一类潜在的绿色的杀线虫(尤其南方根结线虫)的化合物，通过活性评估对比，可以将其作为先导化合物，为进一步的结构修饰研究奠定基础。

主权项

1.一类潜在的绿色有效防治南方根结线虫的化合物的分离筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1：将马兜铃属植物枝干剪成小段、烘干、粉碎、甲醇提取；/nS2：然后经石油醚、氯仿萃取，浓缩，得石油醚浸膏和氯仿浸膏；/nS3：石油醚浸膏经60～80目粗硅胶拌样，于200～300目细硅胶柱分离，一级洗脱剂先采用石油醚-乙酸乙酯系统以梯度洗脱，再采用乙酸乙酯-甲醇系统以梯度洗脱，最后以甲醇清洗柱子；二级洗脱剂先采用石油醚-氯仿系统以梯度洗脱；再采用氯仿-甲醇系统以梯度洗脱，最后以甲醇清洗柱子；洗脱之后得到的每个流分均采用反复的凝胶柱层析、沉淀和重结晶，先后得到纯的化合物，于冰箱保存待进行进一步的结构分析和活性评价；/nS4：氯仿浸膏经60～80目粗硅胶拌样，于200～300目细硅胶柱分离，一级洗脱剂采用石油醚-丙酮系统以梯度洗脱，再采用丙酮-甲醇系统以梯度洗脱，最后以甲醇清洗柱子；二级洗脱剂先采用石油醚-氯仿系统以梯度洗脱；再采用氯仿-甲醇系统以梯度洗脱，最后以甲醇清洗柱子；洗脱之后得到的每个流分均采用反复的凝胶柱层析、沉淀和重结晶，于冰箱保存待进行进一步的结构分析和活性评价；/n步骤S3中所述石油醚-乙酸乙酯系统和石油醚-氯仿系统进行梯度洗脱的体积比均为100:0，99:1，98:2，96:4，92:8，90:10，88:12，85:15，83:17，80:20，75:25，70:30，65:35，60:40，50:50，30:70，0:100；所述乙酸乙酯-甲醇系统和氯仿-甲醇系统的体积比为9:1，5:5；步骤S4中所述石油醚-丙酮系统和石油醚-氯仿系统进行梯度洗脱的体积比均为：100:0，95:5，90:10，85:15，70:30，50:50，25:75，10:90；所述丙酮-甲醇系统和氯仿-甲醇系统进行梯度洗脱的体积比均为9:1，5:5；所述凝胶柱均为sephadex LH-20；/n所述化合物的结构式分别如式A、B和C所示：/n /n