[发明专利]一种细胞外泌体的提取方法在审
| 申请号： | 201710810251.X | 申请日： | 2017-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN108865983A | 公开（公告）日： | 2018-11-23 |
| 发明（设计）人： | 杨前;刁波;王刚;袁紫林;陈力 | 申请（专利权）人： | 江苏国立生物研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 武汉今天智汇专利代理事务所(普通合伙) 42228 | 代理人： | 邓寅杰 |
| 地址： | 215000 江苏省苏州市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种细胞外泌体的提取方法，包括以下步骤：（1）上清液分离：将细胞培养后的培养基，离心去除杂质，分离出培养上清液；（2）一次提取：将步骤（1）所述培养上清液与外泌体提取液混合后进行孵育，孵育后得第一孵化液，对第一孵化液进行离心浓缩，得到含外泌体的浓缩液；（3）二次提取：将步骤（2）所述含外泌体的浓缩液加入无菌PBS溶解后加入外泌体提取液进行孵育，孵育后得第二孵化液，将第二孵化液进行离心收集底部沉淀，得细胞外泌体。本发明有效地提高细胞外泌体的纯度，降低其杂蛋白含量。 | ||
| 搜索关键词： | 孵化液 孵育 细胞 培养上清液 浓缩液 细胞培养 离心去除杂质 上清液分离 提取液混合 二次提取 离心浓缩 离心收集 培养基 无菌PBS 提取液 有效地 杂蛋白 沉淀 溶解 | ||
【主权项】：
1.一种细胞外泌体的提取方法，其特征在于，所述细胞外泌体通过以下步骤提取：步骤（1）：上清液分离，将细胞培养后的培养基，离心去除杂质，分离出培养上清液；步骤（2）：一次提取，将步骤（1）所述培养上清液与外泌体提取液混合后进行孵育，孵育后得第一孵化液，对第一孵化液进行离心浓缩，得到含外泌体的浓缩液；步骤（3）：二次提取，将步骤（2）所述含外泌体的浓缩液加入无菌PBS溶解后加入外泌体提取液进行孵育，孵育后得第二孵化液，将第二孵化液进行离心收集底部沉淀，得细胞外泌体。
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