[发明专利]一种适用于尿道修复重建的支架材料的制备方法

摘要

本发明提供了一种适用于尿道修复重建的支架材料的制备方法，包括以下步骤(1)制备大孔径高孔隙率的包皮脱细胞基质；(2)制备左氧氟沙星PLGA共聚物纳米微囊，将制备的微囊进行重悬，大孔径高孔隙率包皮脱细胞基质浸入微囊溶液中，静置后干燥处理。本发明将包皮环切术后废弃的包皮作为原材料，利用过氧乙酸的氧化性制备了高孔隙率和大孔径的包皮脱细胞基质，更有利于营养物质的输送和代谢废物的排出以及细胞的长入。制备了能缓释左氧氟沙星的PLGA纳米微囊，并将纳米微囊复合在支架材料上，赋予了支架持续释放左氧氟沙星的抗菌特性，该特性可降低组织工程尿道修复重建术后的感染率，从而降低因尿路感染导致的尿道修复重建的失败率。

主权项

一种适用于尿道修复重建的支架材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、制备大孔径高孔隙率的包皮脱细胞基质：a.收集经包皮环切术后废弃的包皮，清水洗净，蒸馏水浸泡并置于恒温振荡器内振荡48小时，振荡频率为125r/min，温度为25℃；b.将清洗振荡后的包皮置于5％的过氧乙酸中4‑6小时进行氧化；c.将氧化后的包皮用蒸馏水洗净，加入500mL含1％Triton X‑100和0.1％氨水中14天进一步脱去细胞成分；同时置于恒温振荡器内振荡，振荡频率为125r/min，温度为25℃；后用蒸馏水洗净，冷冻干燥机将上述包皮脱细胞基质冻干处理并封装，CO60γ射线辐射灭菌，4℃保存；步骤2、制备左氧氟沙星PLGA共聚物纳米微囊，将制备的微囊进行重悬，大孔径高孔隙率包皮脱细胞基质浸入微囊溶液中，静置后干燥处理；a.秤取左氧氟沙星8mg，PLGA 80mg，将两者溶解在2mL的二氯甲烷中；b.待上述溶剂充分溶解后，倒入n mL的含1％的聚乙烯醇水溶液中，在冰水浴溶液中涡旋1min，静置5min，再在200W功率条件下超声乳化1min，之后加入m mL的的含1％聚乙烯醇的水溶液室温下磁力低速300r/min搅拌过夜，通过挥发去除二氯甲烷，其中n：m＝3:5～12，通过调整n、m的比例可满足左氧氟沙星载药量达到较高的同时包封率较高且缓释性能达到最佳；c.将上述含纳米微囊的悬液于11000r/min下高速离心30min收集纳米粒，以蒸馏水反复洗涤、冻干、CO60γ射线辐射灭菌，制得左氧氟沙星PLGA纳米微囊；d.重悬步骤2中步骤c得到的左氧氟沙星PLGA纳米微囊，将步骤1制得的大孔径高孔隙率包皮脱细胞基质浸入纳米微囊溶液中10h，静置后干燥处理。