[发明专利]一种用于三聚氰胺检测的芯-壳型表面分子印迹微球的制备方法

摘要

一种用于三聚氰胺检测的芯‑壳型表面分子印迹微球的制备方法，包括如下两个步骤：首先，将苯乙烯、甲基丙烯酸单体分散在水中，以过硫酸钾为引发剂在氮气气氛下反应制备表面富含羧基的聚苯乙烯微球；然后，再将三聚氰胺、甲基丙烯酸、亚苯基双丙烯酰胺、偶氮二异庚腈与上述所制备的聚苯乙烯微球表面反应，得到三聚氰胺分子印迹的芯‑壳型微球，洗脱位于印迹微球壳层中的三聚氰胺印迹分子，壳层的内部形成具有与印迹分子结构、大小和功能基互补的空穴结构，洗脱印迹分子的芯‑壳型微球拥有对目标分析物三聚氰胺分子的特异性识别和敏感性检测的功能，彼此空间相互接近时，在浓度差推动力的作用下，实现对目标分析物三聚氰胺分子选择性识别和检测。

主权项

1.一种用于三聚氰胺检测的芯‑壳型表面分子印迹微球的制备方法，其特征在于：所述的印迹微球中洗脱了位于壳层的三聚氰胺印迹分子，壳层的内部形成具有与印迹分子结构、大小和功能基互补的空穴结构，洗脱印迹分子的微球具有对目标分析物分子的特异性识别位点，微球壳层识别位点表面富含吸电子的羧基基团，进入识别位点的目标分析物三聚氰胺分子拥有三个给电子的氨基基团，二者之间以非共价键形式相互作用，实现对目标分析物分子选择性识别和检测，所述的芯‑壳型表面分子印迹微球的制备过程包括如下两个步骤：1.1第一步是表面富含羧基的功能性单分散聚苯乙烯微球的制备：首先，量取90~100mL的苯乙烯单体，加入到250mL的分液漏斗中，用20~30mL的5%NaOH水溶液清洗3次，再用去离子水洗至中性，转移至250mL锥形瓶中，加无水硫酸钠干燥，干燥后的苯乙烯在氮气气氛保护下进行减压蒸馏，收集13.3kPa/82~83℃馏分，完成对苯乙烯单体的纯化，然后以250mL带有磨口塞的三口烧瓶为反应容器，将5~9mL苯乙烯、0.5~0.9mL甲基丙烯酸分散在80~85mL去离子水中，并加入过硫酸钾40~45mg，通氮气0.3h后，用磁力搅拌器在70℃，500rpm转速搅拌反应10h后，再升温至80℃反应0.5h，获得表面富含羧基的聚苯乙烯微球，再用95%乙醇多次超声分散清洗和离心，去除未反应的底物，最后将所得聚苯乙烯微球重新分散在去离子水中，密封避光保存待用；1.2第二步是芯‑壳型表面分子印迹微球的制备：量取上述制得的表面富含羧基的聚苯乙烯微球4~5mL置于100mL磨口锥形瓶中，再向此锥形瓶中加入35~40mL甲醇，8~10mL乙腈，超声5min，使其完全分散，再取25~30mg三聚氰胺超声分散在上述溶液中后，取9~10μL功能单体，95~100μL交联剂和5~6mg引发剂加至上述混合溶液中，冰浴超声5min，反应混和物在冰浴条件下通氮气10分钟后，在磨口玻璃塞的表面涂抹高温脂密封反应混合物体系，使其在氮气气氛中进行聚合反应，然后将上述混合溶液的锥形瓶置于摇床中，以300rpm转速分阶段升温，先在50℃下预聚合反应4小时后，升温至55℃下聚合反应4小时，再升温至60℃下聚合反应8小时，待反应完成，用乙腈清洗三次，再用甲醇清洗三次后，将所得的芯‑壳型表面分子印迹微球在体积比为8:1:1的甲醇/乙腈/乙酸混合液中反复回流萃取三聚氰胺分子，直到提取液在240nm处无紫外吸收，最后将上述制得的芯‑壳型表面分子印迹微球用甲醇洗涤，并浸泡过夜，再用甲醇超声分散和离心清洗多次，得到对三聚氰胺分子具有识别和检测功能的芯‑壳型表面分子印迹微球，再将其重新分散在甲醇中，密封避光保存。