[发明专利]一种提取格兰地新和黄连碱的方法和应用

摘要

本发明属于中药提取技术领域，公开了一种提取格兰地新和黄连碱的方法和应用，本发明要解决的技术问题为黄连碱和格兰地新提取的新技术和新用途，采用此方法提取黄连碱和格兰地新避免了反复柱层析而大量使用有机溶剂和繁琐费时，本发明还提供了格兰地新和黄连碱在预防和治疗老年痴呆症方面的新用途，其主要作用机理在于对乙酰胆碱酯酶的作用。

主权项

1.一种提取格兰地新和黄连碱的方法，其特征在于，包括如下步骤：/n1）黄连或者黄连须根粉碎提取母液：首先取出一公斤的黄连使用药材粉碎机进行粉碎或者黄连须根剪断粉碎；加浓盐酸10-20ml沉淀小檗碱，硅藻土过滤，母液备用；/n2）母液去除油脂；向母液中加入氨水调节pH值为11，过滤，往滤液中再加入乙醚或者石油醚萃取，除去低极性的油脂；/n3）结晶：利用黄连碱在乙醇中溶解度较大，含量相对较高，其硫酸盐不溶于水及乙醇的物理性质，黄连碱的硫酸盐在乙醇中溶解度为1：500，小檗碱室温下的硫酸盐在乙醇中溶解度为1：30，在上述的碱溶液中加入浓度为90%的硫酸，边搅拌边逐滴加入，直至有黄色沉淀产生，黄色沉淀用1L-2L的乙醇在50℃超声溶解，逐滴加5-10ml硫酸反复重结晶两到三次，得到80%以上硫酸黄连碱沉淀，HPLC检测纯度为85%以上，然后加入摩尔比为1:1氯化钡溶液回流半小时，过滤浓缩，甲醇丙酮重结晶，以此得到黄连碱盐酸盐的晶体400-800mg；/n4）浓缩：使用上述剩余母液，用5%-10%的氢氧化钠调节滤液的pH值为10-11，游离出酚性生物碱，再通过过滤器进行过滤，滤液用浓度为5%-10%的稀盐酸调节到pH值为7，上大孔树脂D101，以每分钟0.5%-2.5%的柱体积速度进行上柱吸附，再用95%乙醇进行洗脱，以此浓缩得到粗浸膏，粗浸膏使用1mol/L氨水溶解，以此得到上柱液；/n5）上柱：上柱时，按照柱体积的0 .5%～1 .0%/min上聚酰胺柱，然后，再使用0 .8 -1.5mol/L的氨水洗脱；/n6）洗脱收集：按照柱体积的0.5%～1.0%/min上柱洗脱，当组分下移到柱子底部四分之三时，从上到下依次呈现A、B、C三个色带，收集B色带，然后用甲苯、乙酸乙酯、醋酸和甲醇按照体积比为4:2:1:1的展开剂和1份氨水双槽展开进行薄层鉴定，B色带组分为药根碱、非洲防己碱、格兰地新的混合物，用薄层层析检验流份，合并相同流份；/n7）制取格兰地新：调节B色带组组分的pH值为7，上大孔树脂D101，以每分钟0.5%-2.5%的柱体积速度进行上柱吸附，水洗脱去无机盐，再使用95%乙醇洗脱，浓缩得到粗浸膏，丙酮和甲醇重结晶得到药根碱，母液为药根碱和非洲防己碱、格兰地新的混合物，母液用100-200目硅胶拌样，300-400目硅胶柱层析，用氯仿和甲醇按照体积比为10:1到20:1的比例洗脱，再用甲苯、乙酸乙酯、醋酸和甲醇按照体积比为4:2:1:1的展开剂和1份氨水双槽展开，进行薄层鉴定，合并相同Rf值得到格兰地新，HPLC检测纯度为95%。/n