[发明专利]一种从鸡蛋中提取卵转铁蛋白及其冻干粉的制备方法

摘要

本发明公开了一种从鸡蛋中提取卵转铁蛋白来制备冻干粉的方法，其包括以下步骤：（1）制备蛋清稀释液；（2）分离卵粘蛋白；（3）调节PH；（4）硫酸铵沉淀；（5）离子交换洗脱；（6）浓缩、真空冷冻干燥，研磨处理，即制得卵转铁蛋白冻干粉。本发明采用硫酸铵盐析和离子交换层析的方法对鸡蛋清中的卵转铁蛋白进行分离，以期建立从蛋清中提取卵转铁蛋白的工艺，为其开发利用奠定基础，其制备的冻干粉便于储藏、运输，本发明的冷冻干粉可作为功能性成分添加到各类食品，或制成天然抗菌药物或高效补铁剂，以及用于化妆品中增强抗衰老功效。此外，还可用于治疗大肠杆菌、假单胞杆菌、链球菌、金黄色葡萄球菌、李氏杆菌及衣原体等的治疗药物。

主权项

一种从鸡蛋中提取卵转铁蛋白来制备冻干粉的方法，其特征在于，其包括以下步骤：（1）制备蛋清稀释液：将新鲜鸡蛋洗净，置于2‑3℃下冷藏3‑6h，然后将冷藏的鸡蛋进行分离蛋黄与蛋清，取蛋清液，在蛋清液中加入等于蛋清体积的水进行稀释，得到蛋清稀释液，并置于3℃的冰箱中冷藏至少一小时；（2）分离卵粘蛋白：在蛋清稀释液中加入3mol/L的HCL调节PH至5.8，并用300‑450r/min的搅拌机进行搅拌5h，使得卵粘蛋白沉淀，之后利用离心机离心，去除沉淀，得到上清液；（3）调节PH：将步骤（2）得到的上清液中加入2mol/L的NaOH溶液，调节PH至7.5，并用600‑800r/min的搅拌机搅拌0.5‑1h，然后，置于3℃的冰箱中冷置2h，之后用离心机离心，去除沉淀，得到上清液；（4）硫酸铵沉淀：在所述步骤（3）的上清液中加入40%饱和度的硫酸铵，在4℃下静置2h，然后利用5000r/min的离心机离心30min；然后，取上清液再加入85%饱和度的硫酸铵，在4℃下静置1h，然后利用5500r/min的离心机离心20min； 沉淀用蒸馏水溶解、 透析脱盐；透析的蛋清液用3mol/L的NaOH溶液调节PH至8.2，然后在离心20min，取上清液；（5）利用Q‑Sepharose Fast Flow离子交换柱，用PH为8.2的HCL缓冲液平衡离子交换柱，然后，将步骤（4）得到的上清液以2.5ml/min的流速加入离子交换柱中，然后分别用含0.01mol/L、0.02mol/L、0.03mol/L、0.05mol/L、0.1mol/L的NaCL溶液以1Ml/min的流速进行分步洗脱，并收集含有卵转铁蛋白的洗脱液；（6）将卵转铁蛋白的洗脱液进行浓缩、真空冷冻干燥，研磨处理，即制得卵转铁蛋白冻干粉。