[发明专利]一种用于染色体异常检测的文库构建方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201710650277.2 | 申请日： | 2017-08-01 |
| 公开（公告）号： | CN107217310A | 公开（公告）日： | 2017-09-29 |
| 发明（设计）人： | 洪燕;白金蕾;玄兆伶;李大为;梁峻彬;陈重建 | 申请（专利权）人： | 安诺优达基因科技（北京）有限公司 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100176 北京市大兴区北京经济*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种用于染色体异常检测的文库构建方法，通过对反应体系及反应条件的优化，实现了对羊水、脐血等少量样本的文库构建，缩短患者在临床染色体异常检测的等待时间。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 染色体 异常 检测 文库 构建 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种用于染色体异常检测的文库构建方法，该方法包括：步骤A：提取样本gDNA，获得gDNA；步骤B：将所述gDNA进行酶切处理，纯化，获得酶切产物；步骤C：将所述酶切产物进行末端修复，纯化，得到平末端DNA片段；步骤D：将所述平末端DNA片段进行3'端加A，得到3'端加A的DNA片段；步骤E：将所述3'端加A的DNA片段进行加接头，纯化，得到加接头的DNA片段；步骤F：将所述加接头的DNA片段进行PCR扩增，纯化，得到扩增产物；其中，步骤B中所述的酶切处理使用的酶为dsDNA Fragmentase；步骤C中所述末端修复使用试剂包括：1μL T4 DNA聚合酶，1μL T4多聚核苷酸激酶、5μL 10×多聚核苷酸激酶缓冲液及1μL dNTP；步骤D中所述3'端加A使用试剂包括：0.5μL Klenow片段(3'‑5'exo‑)、2.5μL dATP及2.5μL 10×缓冲液；步骤F中所述PCR扩增的扩增引物包括：Ann引物序列(SEQ ID NO:1)：5'‑AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGAC‑3'Index引物序列(SEQ ID NO:2)：5'‑CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATANNNNNNNGTGACTGGAGTTC‑3'；其中，N为随机碱基。
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