[发明专利]一种利用杆状病毒表达外源蛋白的方法及其应用有效
| 申请号： | 201710633480.9 | 申请日： | 2017-07-28 |
| 公开（公告）号： | CN109306360B | 公开（公告）日： | 2022-07-15 |
| 发明（设计）人： | 田克恭;张海洋;孙进忠;张许科 | 申请（专利权）人： | 普莱柯生物工程股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/866 | 分类号： | C12N15/866 |
| 代理公司： | 北京华夏正合知识产权代理事务所(普通合伙) 11017 | 代理人： | 韩登营 |
| 地址： | 471000 *** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种杆状病毒高效表达外源蛋白的方法的方法，该方法通过在病毒吸附后使用D‑氨基葡萄糖细胞孵育细胞，能显著提高外源蛋白的表达量，表达量能提高一倍。该方法适应性广，能针对多种外源蛋白进行高效表达。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 杆状病毒 表达 蛋白 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种杆状病毒表达外源蛋白的方法，包括如下步骤：步骤(1)细胞的培养：将昆虫细胞经传代、加入培养基培养所述昆虫细胞，形成生长良好的细胞单层；步骤(2)病毒接种与吸附：将重组有外源蛋白基因的重组杆状病毒接种于所述步骤(1)中所述的细胞单层，进行病毒吸附；步骤(3)细胞的孵育：待所述步骤(2)所述重组杆状病毒吸附完成后，加入D‑氨基葡萄糖进行细胞孵育；步骤(4)外源蛋白的表达：待所述步骤(3)所述细胞孵育完成后，将D‑氨基葡萄糖洗去，加入培养基培养细胞以扩增重组杆状病毒、表达外源蛋白；以及步骤(5)收获所述表达的外源蛋白：收集培养基中所述表达的外源蛋白。
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