[发明专利]一种产磷脂酶D的重组大肠杆菌及其应用有效
| 申请号： | 201710594567.X | 申请日： | 2017-07-20 |
| 公开（公告）号： | CN107384844B | 公开（公告）日： | 2019-11-08 |
| 发明（设计）人： | 刘立明;秦雯;吴承晋;华嘉伟 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N9/16;C12N15/70;C12P13/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种产磷脂酶D的重组大肠杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段从生二素链霉菌(Streptomyces ambofaciens)中克隆获得磷脂酶D基因，将构建好的表达质粒导入E.coli BL21(DE3)，通过卡那霉素抗性平板筛选获得表达载体高拷贝重组的含磷酸酶工程菌。并将重组磷脂酶D用于转化磷脂酰胆碱和丝氨酸生产磷脂酰丝氨酸，实现维生素C‑2‑磷酸酯的高效生产。在40℃、pH4.5的条件下反应2h，磷脂酰丝氨酸产量可达15.8g/L，转化率为63.9％，时空产率为7.9g/L/h。 | ||
| 搜索关键词： | 磷脂酰丝氨酸 重组大肠杆菌 磷脂酶D 生物工程技术领域 分子生物学手段 卡那霉素抗性 生二素链霉菌 磷脂酶D基因 磷脂酰胆碱 重组磷脂酶 表达载体 表达质粒 高效生产 平板筛选 时空产率 维生素C 高拷贝 含磷酸 磷酸酯 酶工程 丝氨酸 构建 应用 克隆 转化 生产 | ||
【主权项】：
1.一种高产磷脂酶D的基因工程菌，其特征在于，以大肠杆菌为宿主，表达磷脂酶D；所述磷脂酶D的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述磷脂酶D由pET28a(+)为载体进行表达，编码所述磷脂酶D的基因序列如SEQ ID NO.2所示。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江南大学，未经江南大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201710594567.X/，转载请声明来源钻瓜专利网。
