[发明专利]抗氧化鲢鱼肝脏蛋白的制备方法

摘要

本发明公开了一种抗氧化鲢鱼肝脏蛋白的制备方法，其包括以下步骤：步骤一，将脱脂处理后的鲢鱼肝脏加入磷酸缓冲液进行超声预处理；超声频率24kHz，超声功率50‑100W，处理时间为3‑7min；步骤二，进行灭酶处理，之后离心制得上清液和残渣；步骤三，取上清液透析，冷冻干燥得缓冲液提取蛋白；步骤四，取残渣加入NaOH溶液水浴灭酶15‑25min；离心制得二次上清液；将二次上清液在pH8.0的Tris‑HCl缓冲液中透析78h，其中每8‑12h更换一次透析液，冷冻干燥得碱提蛋白。本发明利用超声辅助缓冲溶液提取和碱提鲢鱼肝脏蛋白，操作简单，处理时间短，蛋白得率较高且所得两种蛋白的抗氧化活性较好。

主权项

一种抗氧化鲢鱼肝脏蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，将脱脂处理后的鲢鱼肝脏加入磷酸缓冲液进行超声预处理；超声频率24kHz，超声功率50‑100W，处理时间为3‑7min；步骤二，进行灭酶处理，之后离心制得上清液和残渣；步骤三，取上清液在pH8.0的Tris‑HCl缓冲液中透析78h，每8‑12h更换一次透析液，冷冻干燥得缓冲液提取蛋白；步骤四，取残渣加入10‑20倍0.1M的NaOH溶液，置于水浴摇床中恒温振荡，转速为150‑300rmp/min，提取8‑16h后，在90‑100℃水浴锅中灭酶15‑25min；之后离心制得二次上清液；将二次上清液在pH8.0的Tris‑HCl缓冲液中透析78h，其中每8‑12h更换一次透析液，冷冻干燥得碱提蛋白。