[发明专利]一种在线快速筛选和定量中药中抗氧化活性成分的方法

摘要

本发明属于医药领域，具体涉及一种既能筛选又能定量中药中的抗氧化活性成分的ABTS⁺‑CE‑DAD方法。为了验证该方法的可行性，选择了舒血宁为例，筛选并确定了其中存在的9种抗氧化活性成分。实验过程中优化了缓冲液的pH值和磷酸盐浓度，十二烷基硫酸钠和β‑环糊精的浓度，乙腈的含量以及温度和电压等反应条件。在相同的条件下，ABTS⁺和舒血宁注射液样品先后进样，随后具有抗氧化活性的成分与ABTS⁺反应并被分离检测。同时，利用确定的条件也能对检测到的这几种抗氧化活性成分进行定量，并发现样品中这些活性成分的总含量与总的抗氧化活性有线性关系。方法学结果证明，本发明是可以应用于筛选中药中活性化合物的在线方法，且简便、可靠、低耗、环保以及易于自动化。

主权项

1.一种在线快速筛选或/和定量中药舒血宁注射液中的抗氧化活性成分的ABTS⁺‑CE‑DAD方法，所述抗氧化活性成分为蝶豆素，芦丁，异槲皮苷，槲皮素‑3‑O‑葡萄糖基（1‑2）鼠李糖苷，山奈酚‑3‑O‑芸香糖苷，山奈酚‑7‑O‑β‑D‑葡萄糖苷，大波斯菊苷，3‑O‑{2‑O‑[6‑O‑(对羟基‑反‑香豆酰)‑葡萄糖基]‑鼠李糖基}槲皮素，3‑O‑{2‑O‑[6‑O‑(对羟基‑反‑香豆酰)‑葡萄糖基]‑鼠李糖基}山奈酚，所述ABTS为2,2‑联氮‑二(3‑乙基‑苯并噻唑‑6‑磺酸)二铵盐，所述CE为毛细管电泳仪，所述DAD为二极管阵列检测器，其特征在于，在线筛选或/和测定抗氧化活性成分的毛细管电泳水相缓冲液的组成是为10mM～30mM磷酸盐，0mM～10mM 的β‑环糊精，20mM～60mM的十二烷基硫酸钠和体积百分比为2.5%～10%的乙腈，其中所述的磷酸盐是通过NaH₂PO₄ 和Na₂HPO₄ 混合得到的；所述毛细管电泳水相缓冲液的pH值为6.5～7.5；整个实验过程中，电压是18kV～22kV，卡盒的温度控制在19℃～25℃；中药样品的检测波长是360nm， ABTS⁺的检测波长是405nm。