[发明专利]一种外源蛋白安全性的快速评价方法有效
| 申请号： | 201710506166.4 | 申请日： | 2017-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN107354169B | 公开（公告）日： | 2020-07-31 |
| 发明（设计）人： | 赵慧;江晓曦 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N1/19;A01K67/02;A23K50/50;A23K10/16;C12R1/84 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 苏运贞;裘晖 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种外源蛋白安全性的快速评价方法。本发明通过将编码外源蛋白的基因克隆入pPICZb载体，得到外源蛋白表达重组载体转化毕赤酵母，得到表达外源蛋白的毕赤酵母；将表达外源蛋白的毕赤酵母每天灌胃啮齿类动物，连续90天；日常观察啮齿类动物的健康状态；90天末处理啮齿类动物，取肝、脾、心和肾组织，石蜡切片；免疫组化鉴定外源蛋白在组织器官中的分布以及病理切片分析各组各器官的炎症反应情况；依据炎症反应情况，判断该外源蛋白的安全性。本发明具有如下优点：高通量；可放大外源蛋白暴露浓度，缩短评估周期；可研究剂量与安全性关系；可研究蛋白活性与安全性关系。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 蛋白 安全性 快速 评价 方法 | ||
【主权项】：
一种外源蛋白安全性的快速评价方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将编码外源蛋白的基因克隆入pPICZb载体，得到外源蛋白表达重组载体；(2)将外源蛋白表达重组载体转化毕赤酵母，筛选，鉴定，得到表达外源蛋白的毕赤酵母；(3)将表达外源蛋白的毕赤酵母每天灌胃啮齿类动物，连续90天；同时设置空白对照组和阴性对照组；空白对照组为正常饮食+生理盐水，阴性对照组I为正常饮食+毕赤酵母宿主菌，阴性对照组II为正常饮食+转化pPICZb载体的毕赤酵母菌，实验组即为正常饮食+表达外源蛋白的毕赤酵母；(4)日常观察啮齿类动物的健康状态；(5)90天末处理啮齿类动物，取肝、脾、心和肾组织，石蜡切片；(6)免疫组化鉴定外源蛋白在组织器官中的分布；(7)病理切片分析各组各器官的炎症反应情况；(8)依据炎症反应情况，判断该外源蛋白的安全性。
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