[发明专利]一种基于糖蛋白非糖肽的质谱多反应监测定量糖蛋白方法有效
| 申请号： | 201710495427.7 | 申请日： | 2017-06-26 |
| 公开（公告）号： | CN107576733B | 公开（公告）日： | 2020-11-24 |
| 发明（设计）人： | 曹纬倩;蒋碧云;黄江铭;杨芃原 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06;G01N27/62 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 吴桂琴 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属分析化学技术领域，涉及糖蛋白质谱相对/绝对定量的方法，具体涉及一种基于糖蛋白非糖肽的质谱多反应监测定量糖蛋白方法，其包括：利用肼化学法对样品中的糖蛋白进行富集，用蛋白酶释放糖蛋白的非糖肽，利用色谱‑质谱鉴定技术对非糖肽进行鉴定，合成适用于MRM定量的标准肽段，然后对这些肽段的保留时间，能量，母子离子对进行质谱优化，并建立相应的数据库；并将肽段可用于样品中糖蛋白的绝对/相对定量。本发明方法步骤简单、操作方便、快速高效，可以实现糖基化的单个蛋白质/糖蛋白质组的快速、精准定量。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 糖蛋白 糖肽 质谱多 反应 监测 定量 方法 | ||
【主权项】：
一种基于糖蛋白非糖肽的质谱多反应监测定量糖蛋白的方法，其特征在于，采用肼化学法及串联质谱法鉴定糖蛋白上的非糖肽，其中，对所述非糖肽进行挑选并合成标准肽段，利用质谱多反应监测技术对所述非糖肽进行质谱定量条件优化后，实现所述非糖肽的糖蛋白质的相对/绝对定量；其包括步骤：(1)用肼化学法特异性的富集样品中的糖蛋白；(2)用蛋白酶释放糖蛋白的非糖肽，所述的非糖肽为糖蛋白上不含糖基化位点的肽段；(3)用色谱‑质谱技术鉴定所述的非糖肽；(4)挑选可用于质谱多反应监测分析的非糖肽，并合成标准非糖肽；(5)利用质谱多反应监测技术对获得的标准的非糖肽进行质谱优化；并利用优化的条件实现样品中糖蛋白质的相对/绝对定量。
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