[发明专利]一种血液及组织中甲酸浓度的检测方法在审

专利信息
申请号: 201710479171.0 申请日: 2017-06-22
公开(公告)号: CN109115896A 公开(公告)日: 2019-01-01
发明(设计)人: 陈捷敏;夏文涛 申请(专利权)人: 司法部司法鉴定科学技术研究所
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/16;G01N30/86
代理公司: 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 代理人: 吴桂琴
地址: 200063 上*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明属于生物化学检测领域,具体涉及一种血液及组织中甲酸浓度的检测方法。本发明的检测方法包括,采用MP*FastPrep‑24样品处理系统处理动物组织,并获得含甲酸样品,进一步通过HPLC法结合标准曲线获得组织样本中甲酸的浓度。本发明首次采用MP*FastPrep‑24样品处理系统结合HPLC法实现对动物组织中甲酸含量的测定,结果可靠稳定,本发明方法对司法工作实践具有重要意义。
搜索关键词: 甲酸 样品处理系统 动物组织 检测 生物化学检测 血液 标准曲线 工作实践 重要意义 组织样本 司法
【主权项】:
1.一种血液及组织中甲酸浓度的检测方法,其特征在于,所述方法包括:(1)对大鼠进行甲醇灌胃染毒,同时提取甲醇中毒3天组和7天组的血、肝、肾、脑和胃组织;(2)采用MP* FastPrep‑24样品处理系统( MP Biomedicals, LLC, Solon, OH, USA)处理组织,配合磁珠强大的振动作用,最大限度地将甲酸从心、肝、肾、脑和胃组织样本中提取出来,其中振荡速度设置为4.5m/s,时间为2‑3min;(3)将步骤(2)中获得的样本放在离心机中,10000rpm,离心10min;(4)取20µL步骤(3)获得的上清液进样HPLC检测;所述HPLC检测采用Thermo U3000 HPLC仪(Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA),色谱柱为CALESIL ODS‑100 C18 column (5 um, 4.6×250mm),进样20µL,流速控制在1mL/min, 流动相为甲醇与超纯水的混合物,二极管阵列检测器(Diode Array Detector,DAD),温度设置为周围环境; 在检测甲酸浓度前,拟检测波长设置为215nm;在空白溶剂中添加甲酸,以确定甲酸色谱峰的保留时间;为绘制标准曲线,一系列已知浓度的甲酸标准品溶液与流动相按照相同比例混合进样检测。
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