[发明专利]一种pH刺激响应性的线形二嵌段聚合前药的制备方法

摘要

本发明公开了一种pH刺激响应性的线形二嵌段聚合前药的制备方法及其体外活性，其关键在于，以可逆加成裂解链转移(RAFT)聚合反应为主，通过改变亲水嵌段与疏水嵌段比例合成不同的聚合前药，进一步用叶酸部分修饰合成pH刺激响应性和靶向性兼具的药物递送体系，实验表明该体系药载量高、水溶性好、毒副作用小，有效地提高了药物的利用率，具有精准、高效治疗癌症的潜能。

主权项

1.一种pH刺激响应性的线形二嵌段聚合前药的制备方法，其特征在于：包含以下步骤：(1) 亲水单体P(OEGMA)m的制备，其反应式如下所示，包含以下步骤：在氩气Ar，2‑10Pa条件下，以CPPA‑NHS为RAFT反应的大分子引发剂，与乙二醇甲基丙烯酸酯OEGMA一并溶于1,4‑二氧六环Dio中，加入偶氮二异丁腈AIBN后，冷冻－解冻循环三次，在70℃下避光反应24h，用液氮冷冻以终止反应，解冻，加3~5mL甲醇稀释，用截留分子量MWCO为3500Da的透析袋在甲醇中透析24 h,浓缩后得到亲水单体P(OEGMA)m，其中m表示OEGMA的聚合度DP，它的范围为5~120；(2) 两亲性单体P(OEGMA)m‑b‑P(MGMA)n的制备，包含以下步骤：a) MGMA的制备，其反应式如下所示，包含以下步骤：在冰浴温度≤0℃和氩气Ar，2‑10Pa条件下，羟基乙酸甲酯MG溶于含三乙胺TEA的二氯甲烷DCM溶液中并搅拌0.5h，然后将甲基丙烯酰氯MA溶于二氯甲烷DCM所形成的混合液缓慢加入，0.5h后置于室温下避光反应12h，过滤除杂,用旋转蒸发仪浓缩溶剂，进一步以乙酸乙酯、正己烷为洗脱剂过硅胶柱除去二取代产物，用旋转蒸发仪浓缩所收集溶液即得纯的2‑甲氧基‑2‑氧代乙基甲基丙烯酸酯MGMA；b) P(OEGMA)m‑b‑P(MGMA)n的制备，其反应式如下所示，包含以下步骤：在氩气Ar，2‑10Pa条件下，将步骤(1)制备的P(OEGMA)m 作为RAFT反应的大分子引发剂，与步骤(2)a)制备的MGMA一起溶于Dio中，加入AIBN后，冷冻－解冻循环三次，在70℃下避光反应24h，用液氮冷冻以终止反应，解冻，加3~5mL甲醇稀释，用MWCO为3500Da的透析袋在甲醇中透析24 h,浓缩后得到两亲性二嵌段聚合物P(OEGMA)m‑b‑P(MGMA)n，其中n表示MGMA的聚合度DP，n的范围为10~120；(3) 聚合前药P(OEGMA)m‑b‑PDOX的制备，其反应式如下所示，包含以下步骤：常温25℃，通氩气 Ar，2‑10Pa条件下，将步骤(2)制备的二嵌段聚合单体P(OEGMA)m‑b‑P(MGMA)n与单水合肼N2H4·H2O溶于N,N‑二甲基甲酰胺DMF与甲醇形成的混合液中,避光反应12h,用MWCO为3500Da的透析袋在水中透析24h后冷冻干燥48h得到含酰肼的两亲物P(OEGMA)m‑ b‑hydrazide，将该物质与盐酸阿霉素DOX·HCl在氩气 Ar，2‑10Pa条件下溶于含等体积甲醇与DMF的混合液中，加入1滴三氟乙酸TFA后避光室温25℃下反应48h，用MWCO为3500Da的透析袋在甲醇中透析，用旋转蒸发仪浓缩后即得到聚合前药P(OEGMA)m‑b‑PDOX，简称为OM@DOX；(4) pH刺激响应性聚合前药OM@DOX纳米胶束的制备，包含以下步骤：取步骤(3)制备的聚合物前药OM@DOX，将OM@DOX溶于含TEA的DMF混合液中，搅拌0.5h后，缓慢滴加至二次水中并搅拌0.5h,用MWCO为3500Da的透析袋在水中透析24h除去有机溶剂，即得到OM@DOX纳米胶束水溶液。