[发明专利]一种同时检测多种真菌毒素的方法

摘要

本发明涉及真菌毒素检测的技术领域，具体涉及一种同时检测多种真菌毒素的方法，包括将样品加入到提取剂中，振荡离心，得到残渣和样品的上清液；向残渣中加入甲醇和纯水，取残渣的上清液；将样品的上清液与残渣的上清液混合为上清液；混合上清液和稀释液，过滤得到提取液；将提取液缓慢通过复合免疫亲和柱并排干，进行至少两次的梯度洗脱并收集洗脱液；将洗脱液用氮气吹干，定容后得到待测液；采用液相色谱质谱联用同时检测待测液中真菌毒素的含量，分别绘制每种真菌毒素的标准曲线，最终计算出样品中真菌毒素的含量。本发明解决了现有的真菌毒素检测方法只能检测单一毒素的缺陷，检测成本低，提高了检测效率，减少了试剂损耗和污染。

主权项

一种同时检测多种真菌毒素的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：步骤一：样品提取将25g样品加入到100mL提取剂中，振荡离心，得到残渣和样品的上清液；向所述残渣中加入体积比为800:200的甲醇和纯水，振荡离心，取残渣的上清液；将所述样品的上清液与所述残渣的上清液混合为上清液；所述提取剂为按照体积比为800:10:190的乙腈、乙酸和纯水混合溶液；按照体积比为10:70的比例混合所述上清液和稀释液，然后用滤纸过滤，得到提取液；所述稀释液为按照浓度比为0.8％:0.02％:0.02％:0.116％的NaCl、KCl、KH2PO4和Na2HPO4·12H2O的混合水溶液；步骤二：提取液净化取所述步骤一中的提取液缓慢通过复合免疫亲和柱并排干，然后用水洗涤两次；再用体积比为2:98的乙酸和甲醇的混合液对复合免疫亲和柱进行至少两次的梯度洗脱，并收集从复合免疫亲和柱流出的洗脱液；将所述洗脱液用氮气吹干，并用50％甲醇溶液定容，得到待测液；步骤三：建立标准曲线用50％甲醇溶液配制一系列包含待检测的多种真菌毒素组分的标准混合溶液，采用液相色谱质谱联用同时检测所述标准混合溶液中的真菌毒素，建立相应的标准曲线；步骤四：检测待测液采用液相色谱质谱联用同时检测所述步骤二中待测液中的真菌毒素的含量，根据所述步骤三中建立的标准曲线进行定量分析；依据所述步骤三中标准溶液的质谱峰面积和浓度分别绘制每种真菌毒素的标准曲线，依据所述待测液的峰面积用外标法求出所述待测液中真菌毒素的浓度，根据所述待测液中真菌毒素的浓度计算出样品中真菌毒素的含量。